Resumo |
A família Orchidaceae é uma das maiores famílias entre as Angiospermas, com espécies terrestres, rupícolas e epífitas, amplamente distribuídas em quase todas as regiões do planeta. Cattleya locatellii é uma espécie rupícola, que foi descrita em 2016, encontrada somente na região sul do estado de Minas Gerais, a cerca de 1500 metros de altitude. Devido à recém-descoberta, pouco se conhece a respeito da diversidade de fungos endofíticos associados a essa espécie. Diante disso, o objetivo do presente trabalho foi descrever um fungo endofítico de C. locatellii, baseado em caracteres morfológicos e moleculares. Plantas de C. locatellii foram coletadas no município de Araponga, no estado de Minas Gerais. A partir das raízes saudáveis, foram realizados isolamentos dos fungos endofíticos através da técnica de cultivo por diluição à extinção. O isolado obtido foi repicado assepticamente para placas de Petri contendo meio de cultura batata dextrose ágar (BDA). O DNA genômico foi extraído utilizando o Kit Wizard Genomic DNA Purification (Promega Corporation, WI). A sequência alvo da região "Internal Transcribed Spacer” (ITS) foi amplificada utilizando os primers ITS5 e LR6. A sequência de DNA foi comparada com sequências disponíveis no banco de dados GenBank, utilizando a ferramenta Mega-BLAST. Análises de máxima verossimilhança e inferência Bayesiana foram realizadas para filogenia molecular. Para caracterização morfológica, foram confeccionadas lâminas em lactoglicerol para visualização em microscópio de luz. As imagens foram obtidas através de um microscópio de luz Olympus BX-53 equipado com uma câmera digital (OLYMPUS Q-Color 5™) e 30 medições das estruturas (hifas e conídios), foram realizadas com auxílio do software (CellSens 1,9 DIGITAL - OLYMPUS). Além disso, o isolado foi cultivado em meio BDA para medição da colônia e caracterização da cultura. Com base nas análises filogenéticas, o isolado foi identificado como uma possível espécie nova pertencente ao gênero Cladophialophora, relacionada filogeneticamente às espécies Cladophialophora inabaensis e Cladophialophora lanosa. O isolado possui hifas septadas, marrom claro quando novas, a marrom escuro com o passar do tempo, com 1,7-2,9 µm (x̅ = 2,25 µm) de largura. Os conídios são sub esféricos a elipsóides, lisos, castanhos claros a escuros, arranjados em cadeia, possuem 9,8-3,8 µm (x̅ = 6,5 µm) de comprimento e 1,9-5,6 µm (x̅ = 4,2 µm) de largura. A colônia em meio BDA é inicialmente cinza, e assume coloração preta com o passar do tempo. Dessa forma, os caracteres morfológicos auxiliaram na confirmação de que o isolado é pertencente ao gênero Cladophialophora, que engloba espécies relatadas como patógenos oportunistas e também ocorrendo em rochas e solos, além de associados endofiticamente à plantas. Esse estudo contribui para o conhecimento sobre a diversidade de fungos endófitos radiculares associados a C. locatellii, além de apresentar novidades taxonômicas a respeito do gênero Cladophialophora. |