"Ciências Básicas para o Desenvolvimento Sustentável"
24 a 26 de outubro de 2023
Trabalho 19622
| ISSN | 2237-9045 |
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| Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
| Nível | Graduação |
| Modalidade | Pesquisa |
| Área de conhecimento | Ciências Biológicas e da Saúde |
| Área temática | Bioquímica |
| Setor | Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular |
| Bolsa | CNPq/Balcão |
| Conclusão de bolsa | Não |
| Apoio financeiro | CNPq |
| Primeiro autor | Bárbara Braga Ferreira |
| Orientador | GUSTAVO COSTA BRESSAN |
| Outros membros | Arthur Wakim Enrici, Elói Quintas Gonçalves da Silva, Larissa Coelho Pereira, Luana de Sousa Ramos |
| Título | Construção de um banco de células para a produção de antígeno quimérico de Leptospira spp. em Escherichia coli |
| Resumo | A leptospirose é uma zoonose que afeta tanto seres humanos quanto animais. É uma doença infecciosa negligenciada causada pela bactéria espiroqueta e Gram negativa Leptospira spp. Existem mais de 260 sorovares patogênicos que divergem na composição dos lipopolissacarídeos (LPS) da parede celular bacteriana. As vacinas comerciais contra a leptospirose são bacterinas, que consistem em formulações contendo células inativadas dos principais sorovares circulantes. Isso significa que múltiplas fermentações de diferentes culturas bacterianas são necessárias para a formulação do produto final. Uma forma de contornar esse problema é através do desenvolvimento de vacinas recombinantes, as quais possibilitam uma maior abrangência na proteção contra os diferentes tipos de sorovares da bactéria. Tal método consiste na expressão heteróloga de proteínas que é um mecanismo simples e de baixo custo. Nossa equipe obteve antígenos quiméricos recombinantes com potencial de serem utilizados em uma vacina contra a leptospirose. Esses antígenos precisam ser obtidos em larga escala, o que torna importante a contrução de bancos de células mestre e de trabalho para facilitar o processo produtivo. Neste contexto, o objetivo do presente trabalho foi a construção de um banco de células para a produção de um antígeno quimérico de Leptospira spp. em E. coli. Para tal, um plasmídeo de expressão foi utilizado para se transformar a bactéria E. coli. Colônias isoladas foram obtidas e utilizadas em etapas subsequentes para avaliação de performance. Foram então realizados experimentos para construção de curvas de crescimento e para a monitoração da viabilidade celular (UFC/mL). A capacidade de indução da proteína quimérica foi também realizada a partir da utilização do indutor IPTG, seguida de análises de SDS-PAGE e Western blotting. Assim, foi selecionado o clone que apresentou maior rendimento para pertencer ao banco de células mestre, que foi montado e terá sua performance avaliada ao longo do tempo. |
| Palavras-chave | Proteína quimérica, Banco de células, Leptospirose |
| Forma de apresentação..... | Painel |
| Link para apresentação | Painel |
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