Resumo |
A evolução das espécies vegetais depende da adaptabilidade às adversidades naturais como clima, disponibilidade de água ou nutrientes e antropológicas como manejo intensivo do solo, poluição e controle químico. Tem sido recorrente a ocorrência de um "distúrbio fisiológico” nos plantios de eucalipto da espécie Eucalyptus grandis nas regiões sul e leste da Bahia. O distúrbio pode ser identificado por um conjunto de anomalias adquiridas no padrão de desenvolvimento do eucalipto: perda de turgor, encarquilhamento e amarelecimento das folhas, seca do ponteiro, multiplicação de ramos na copa devido à perda de dominância apical, necrose do tronco principal na parte inferior devido ou levando à perda de dominância apical, multiplicação de ramos ao longo do tronco e formação de cascas necróticas, enrugadas e secas, ao longo do tronco em árvores adultas, afetando diretamente a qualidade da madeira, consequentemente ocasionando em perdas de produtividade no sistema de plantio. O estudo da expressão diferencia dos genes, que respondem ao distúrbio fisiológico, é fundamental para o melhor entendimento do desenvolvimento do distúrbio, podendo ser utilizados como base para definir marcadores moleculares, auxiliando em um diagnóstico precoce, reduzindo perdas no sistema de plantio de eucaliptos. O presente projeto teve como foco analisar a expressão quantitativa de genes, previamente identificados como marcadores do distúrbio, no pecíolo da folha (segmento da folha que a prende ao ramo ou tronco) de clones de eucaliptos assintomáticos, sintomáticos e resistentes. Para a análise do perfil de expressão dos genes marcadores, foi realizada a extração do RNA do pecíolo, seguindo o protocolo de extração pelo método CTAB 2%, síntese de cDNA e RT-qPCR com os oligonucleotídeos selecionados referentes aos genes de interesse. Os resultados preliminares indicam que o perfil de expressão dos genes marcadores no pecíolo é semelhante aos resultados obtidos nos clones dos caules e folhas de eucalipto. Além disso, foi selecionado genes marcadores, sendo os promotores correspondentes amplificados e sequenciados a partir de DNA genômico de clones suscetíveis sintomáticos e assintomáticos. A análise in sílico dessas sequências está sendo conduzida para a identificação de SNPs nos promotores dos genes marcadores de expressão, permitindo o desenvolvimento de marcadores moleculares a serem utilizados em reações de PCR. |