"Ciências Básicas para o Desenvolvimento Sustentável"

24 a 26 de outubro de 2023

Trabalho 19347

ISSN 2237-9045
Instituição Universidade Federal de Viçosa
Nível Graduação
Modalidade Pesquisa
Área de conhecimento Ciências Agrárias
Área temática Zootecnia
Setor Departamento de Zootecnia
Bolsa CNPq
Conclusão de bolsa Sim
Apoio financeiro CNPq
Primeiro autor Isabela de Oliveira Eiterer
Orientador SIMONE ELIZA FACIONI GUIMARAES
Outros membros DANIELE BOTELHO DINIZ MARQUES, Thaís de Araújo
Título Avaliação da expressão dos genes BMP15 e GDF9 em oócitos com alto e baixo grau de competência em vacas da raça Gir
Resumo Em programas de melhoramento de bovinos leiteiros, novos critérios de seleção estão sendo utilizados para melhorar o desempenho dos animais em características reprodutivas visando um maior sucesso na utilização de tecnologias de reprodução assistida, como a produção de embriões in vitro. Nesse sentido, estudos para identificação de marcadores capazes de predizer a qualidade e competência de oócitos foram desenvolvidos nos últimos anos. Uma dessas abordagens comumente utilizada é a avaliação da enzima glicose-6-fosfato-desidrogenase (G6PDH). Um estudo realizado em roedores mostrou que há uma grande atividade e utilização dessa enzima nos oócitos. Uma forma de analisar a G6PDH é por meio da coloração Azul Cresil Brilhante (BCB), responsável por identificar a atividade intracelular dessa enzima no oócito. A atividade da G6PDH é reduzida em oócitos que completaram sua fase de crescimento. Assim, o BCB é degradado em oócitos com maior atividade da enzima, ficando incolor (BCB-), enquanto que oócitos com baixa atividade da enzima têm seu citoplasma corado de azul (BCB+). Estudos mostram que oócitos BCB+ têm tendência à um maior potencial de desenvolvimento. Além da relação do G6PDH com o desenvolvimento de oócitos, vários genes, como o BMP15 e o GDF9, estão descritos na literatura como reguladores de mecanismos biológicos envolvidos com a competência e maturação oocitária. O BMP15 é um regulador da fertilidade e está associado com a maturação dos folículos. O GDF9 tem o mesmo princípio do BMP15, mas apresenta um papel de desenvolvimento celular. A avaliação da expressão desses genes torna-se de grande importância para o entendimento dos mecanismos relacionados com a qualidade dos oócitos. Assim, objetivou-se identificar diferenças nos padrões de expressão dos genes BMP15 e GDF9 em oócitos com alto (BCB+) e baixo grau de competência (BCB-) em vacas da raça Gir. Quatro vacas púberes com idade entre 6 e 7 anos foram sincronizadas e aspiradas, obtendo-se 6 oócitos de cada animal. Após a aspiração, os oócitos foram submetidos ao teste de coloração de BCB e classificados em BCB+ ou BCB-. Posteriormente, o RNA total das amostras foi extraído e a síntese de cDNA foi realizada. As expressões dos genes BMP15 e GDF9 foram analisadas por RT-qPCR (reação em cadeia da polimerase quantitativa em tempo real). O teste t foi utilizado para comparar as médias de cada tratamento (oócitos BCB+ e oócitos BCB-) para cada gene. Não houve diferenças de expressão entre os tratamentos, o que indica que a fase do ciclo estral em que foram obtidos os oócitos não demonstra diferença de expressão nos genes estudados, apesar desses genes estarem envolvidos no crescimento e desenvolvimento do oócito. Além disso, outras vias gênicas poderiam estar ativadas e estariam envolvidas nesse processo, precisando ser avaliadas em estudos futuros para a total compreensão da aquisição da competência oocitária.
Palavras-chave Azul Cresil Brilhante (BCB), Enzima, Expressão Gênica
Forma de apresentação..... Painel
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