"Ciências Básicas para o Desenvolvimento Sustentável"

24 a 26 de outubro de 2023

Trabalho 18771

ISSN 2237-9045
Instituição Universidade Federal de Viçosa
Nível Ensino médio
Modalidade Pesquisa
Área de conhecimento Ciências Biológicas e da Saúde
Área temática Bioquímica
Setor Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular
Bolsa BIC-Júnior
Conclusão de bolsa Não
Apoio financeiro Outros
Primeiro autor Virginia de Souza Crispim
Orientador TIAGO ANTONIO DE OLIVEIRA MENDES
Outros membros Isabela Malaquias Dalto de Souza, Mariana Grôppo Parma
Título Protocolos de extração de RNA e alvos relacionados ao crescimento de plantas do gênero Urochloa.
Resumo Protocolos de extração de RNA e alvos relacionados ao crescimento de plantas do gênero Urochloa.
Virgínia de Souza Crispim, Tiago Antônio de Oliveira Mendes, Isabela Malaquias Dalto de Souza, Mariana Grôppo Parma

Cerca de 100 milhões de hectares no Brasil são de pastagens cultivadas e, os capins do gênero Urochloa, ocupam mais de 80% dessa área, sendo de grande importância para a agropecuária e para a economia nacional. Apesar disso, tem-se poucas informações e estudos sobre a expressão gênica associadas ao desenvolvimento e ao crescimento de biomassa de plantas desse gênero. O objetivo do trabalho é encontrar o protocolo de extração de RNA que nos forneça, de forma padronizada, efetiva e com qualidade, que possa ser utilizado em abordagens de análise de expressão gênica por PCR em tempo real em todos os tecidos da planta (folha, caule, raiz e semente). Além disso, este extrato será utilizado para identificação genes associados ao crescimento e produção de biomassa de três espécies do gênero Urochloa. Foi realizado o plantio de três espécies de capim, sendo eles a Urochloa brizanta cv. Marandu, Urochloa Humidicula e Urochloa Ruziziensis. Para gerar material a ser usado nas extrações de RNA, foi realizada a semeadura utilizando, em média, 20 sementes por vaso com capacidade de 11 litros, devidamente identificados para cada espécie, com terra previamente adubada e a rega foi realizada de duas a três vezes por semana, de acordo com a necessidade. Foram testados quatro diferentes protocolos de extração de RNA, sendo eles: protocolo de extração adaptado com trizol, protocolo de extração com Concert, protocolo de extração com CTAB e protocolo de extração adaptado com trizol e CTAB. Após a realização de cada um dos protocolos, foi feita a confirmação da extração por eletroforese em gel de agarose e a quantificação dos RNA’s utilizando-se Qubit™ e NanoDrop. Com auxílio da literatura, foram selecionados alvos da família de genes SQUAMOSA-PROMOTER BINDING PROTEIN-LIKE (SPL), responsáveis pelo controle de vários aspectos fundamentais do crescimento e desenvolvimento das plantas, incluindo mudança de fase vegetativa, tempo de floração, ramificação e taxa de iniciação foliar, encontradas em plantas do gênero Arabidopsis Thaliana. Através de transcriptoma e alinhamento de sequências de genes, foram detectadas semelhanças entre os pares de bases da Arabidopsis Thaliana e da Urochloa. O protocolo de extração de RNA adaptado com trizol e CTAB foi o mais eficiente em todos os tecidos das três espécies de Urochloa e, após o alinhamento das sequências de genes, foram encontrados e desenhados primers de quatro alvos da família SPL que estão diretamente relacionados ao desenvolvimento da planta e podem ocasionar maior crescimento de biomassa no capim.
Financiamento: FACEV, Capes, CNPq, Fapemig, Valeouro Biotec
Palavras-chave Produção de biomassa, RNA, Urochloa
Forma de apresentação..... Vídeo
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