"Ciências Básicas para o Desenvolvimento Sustentável"

24 a 26 de outubro de 2023

Trabalho 18705

ISSN 2237-9045
Instituição Universidade Federal de Viçosa
Nível Graduação
Modalidade Pesquisa
Área de conhecimento Ciências Biológicas e da Saúde
Área temática Microbiologia
Setor Departamento de Microbiologia
Bolsa CNPq
Conclusão de bolsa Não
Apoio financeiro CAPES, CNPq, FAPEMIG
Primeiro autor Juliana Silva Carneiro Fonseca
Orientador WENDEL BATISTA DA SILVEIRA
Outros membros Eduardo Luís Menezes de Almeida, Rafaela Zandonade Ventorim
Título Seleção de uma linhagem evoluída de Papiliotrema laurentii com maior taxa de consumo de xilose por evolução adaptativa em laboratório
Resumo A demanda crescente por biodiesel, combustível produzido a partir de óleos vegetais, impulsiona a busca por fontes alternativas para sua produção, como as leveduras oleaginosas, que acumulam lipídios e crescem rapidamente. Por meio da evolução adaptativa em laboratório (ALE), foi selecionada uma linhagem da levedura Papilotrema laurentii UFV-I, denominada ATS-I, capaz de assimilar glicose e xilose, acumular lipídios e tolerar o ácido acético. Para viabilizar sua utilização em biorrefinarias lignocelulósicas, está em andamento uma nova etapa de ALE com o objetivo de aumentar a taxa de consumo de xilose e, consequentemente, a produtividade volumétrica de lipídios. Uma colônia isolada de Papiliotrema laurentii ATS-I foi transferida para 50 mL de meio mínimo Yeast Nitrogen Base (YNB) acrescido de xilose contendo: 6,7 g/L de meio YNB sem aminoácidos e com sulfato de amônio e 20 g/L de xilose; em frasco Erlenmeyer de 250 mL. Após incubação por 16 h a 30 °C e 200 rpm, a cultura foi centrifugada a 4 °C e 10000 x g por 10 min. As células foram lavadas duas vezes com solução salina (0,85 % m/v) e ressuspendidas também em solução salina para ajustar a concentração inicial do inóculo. A levedura foi inoculada em 20 mL de meio YNB acrescido de xilose (20 g/L) em 3 frascos erlenmeyers de 150 mL e em outros 3 frascos com YNB e xilose (30 g/L) com valores de densidade óptica inicial a 600 nm (OD600) de aproximadamente 0,1. O cultivo foi iniciado e mantido em batelada por 24h a 200 rpm e 30°C, dando início à ALE. A cada 24h, 1% do volume de cada frasco foi transferido para um novo meio sob as mesmas condições. Estoques foram feitos a cada 15 dias e mantidos a -80 °C em meio YP líquido [extrato de levedura 2% (m/v), peptona 1% (m/v)] contendo glicerol 50% (v/v). Com o estoque de 30 dias, as linhagens evoluídas e a parental ATS-I foram cultivadas em frascos erlenmeyers contendo meio YNB acrescido de xilose (10 g/L) a fim de estimar a velocidade específica de crescimento. Cabe destacar que a ALE ainda está em curso, portanto, os resultados aqui apresentados referem-se à caracterização do crescimento das linhagens evoluídas após 30 dias. Após este período, observou-se que a estratégia foi eficiente, isto é, as linhagens evoluídas apresentaram uma velocidade específica de crescimento maior do que as linhagens parentais, com destaque para uma das linhagens que estão evoluindo em meios de cultivo contendo 20 g/L de xilose, apresentando velocidade específica de crescimento de 0,33 (h-1), enquanto a da parental corresponde a 0,2713 (h-1). O mesmo cultivo será repetido para as linhagens de 45, 60, 75 e 90 dias. Com base nos resultados obtidos após 30 dias de evolução, espera-se que as linhagens evoluídas que serão selecionadas após 90 dias de evolução apresentem uma velocidade específica de crescimento ainda mais elevada do que as selecionadas após 30 dias de evolução.
Palavras-chave leveduras, evolução adaptativa em laboratório, biodiesel
Forma de apresentação..... Vídeo
Link para apresentação Vídeo
Gerado em 0,68 segundos.