"Ciências Básicas para o Desenvolvimento Sustentável"

24 a 26 de outubro de 2023

Trabalho 18500

ISSN 2237-9045
Instituição Universidade Federal de Viçosa
Nível Graduação
Modalidade Pesquisa
Área de conhecimento Ciências Biológicas e da Saúde
Área temática Bioquímica
Setor Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular
Bolsa CNPq
Conclusão de bolsa Sim
Apoio financeiro CAPES, CNPq, FAPEMIG
Primeiro autor Carlos Junior de Assis Estevao
Orientador GABRIELA PICCOLO MAITAN ALFENAS
Título Produção, Purificação e Aplicação de uma Xilanase do Fungo Ceratocystis Fimbriata
Resumo Xilanases são glicosil hidrolases que catalisam a hidrólise de ligações β-1,4 de xilana produzindo açúcares solúveis. As xilanases apresentam potencial de aplicação em diversos processos biotecnológicos, como branqueamento de polpa de celulose, produção de xilooligossacarídeos e sacarificação de biomassa para produção de bioetanol. O objetivo deste trabalho foi produzir e purificar uma xilanase do fungo Ceratocystis fimbriata para sua aplicação na sacarificação do bagaço de cana-de-açúcar. Para induzir a produção de enzimas, o fungo foi cultivado em meio semi-sólido utilizando sabugo de milho, farelo de trigo e cevada como fontes de carbono, por diferentes tempos, entre 2 e 10 dias. A extração da enzima foi realizada com tampão acetato de sódio, 50 mM, pH 5 à temperatura ambiente. Uma purificação parcial da enzima foi realizada usando o sistema de cromatografia líquida de proteína rápida (FPLC), equipado com uma coluna de troca iônica Q Sepharose. Para a sacarificação do bagaço de cana-de-açúcar pré-tratado alcalino, na concentração de 2 % de biomassa, o coquetel comercial Multifect® CL foi suplementado com a xilanase parcialmente purificada, nas condições de 10 FPU/g de coquetel e 10 U/g de xilanase. As amostras foram coletadas em diferentes tempos, durante 72 horas, e analisadas por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) utilizando a coluna HPX-87P. O cultivo em cevada por 8 dias proporcionou a maior atividade específica da xilanase, 20,15 U/mg. O grau de pureza da xilanase foi confirmado por gel SDS-PAGE após revelação das proteínas com nitrato de prata. A suplementação do coquetel comercial Multifect® CL com xilanase aumentou a liberação de glicose de 3 g/L para 4,24 g/L e a liberação de xilose de 1,9 g/L para 3,45 g/L, indicando sinergismo com outras enzimas. Os resultados mostraram que a xilanase de Ceratocystis fimbriata foi capaz de complementar o coquetel comercial na sacarificação do bagaço de cana-de-açúcar. Portanto, esta enzima tem potencial para aplicação em processos biotecnológicos, principalmente na hidrólise de biomassa para produção de bioetanol.
Palavras-chave enzima fúngica, biomassa lignocelulósica, suplementação enzimática
Forma de apresentação..... Painel
Link para apresentação Painel
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