"Ciências Básicas para o Desenvolvimento Sustentável"

24 a 26 de outubro de 2023

Trabalho 18195

ISSN 2237-9045
Instituição Universidade Federal de Viçosa
Nível Graduação
Modalidade Pesquisa
Área de conhecimento Ciências Biológicas e da Saúde
Área temática Microbiologia
Setor Departamento de Biologia Geral
Bolsa CNPq/Balcão
Conclusão de bolsa Não
Apoio financeiro CNPq
Primeiro autor Fabiana Martins Costa Fontes
Orientador SERGIO OLIVEIRA DE PAULA
Outros membros Luciana de Souza Fernandes
Título Clonagem de virus-like particles (VLPs) do vírus Mayaro
Resumo O vírus Mayaro (MAYV) é um arbovírus pertencente à família Togaviridae e gênero Alphavirus presente em vários países das Américas. Em humanos, provoca uma febre aguda acompanhada de vômito, diarreia e dores articulares, que podem evoluir para um quadro crônico e debilitante de artrite e miosite. No Brasil, o MAYV é responsável por gerar surtos pontuais na região Norte tendo em vista que seu principal vetor, o mosquito Haemagogus janthynomis, é endêmico da região amazônica. Porém, já foi observado que mosquitos adaptados ao ambiente urbano possuem competência para transmitir o vírus. Este cenário reforça a necessidade de se desenvolver alternativas que visem proteger a população por meio do combate ao vírus, uma vez que a globalização desenfreada estimula a disseminação de doenças e ainda não existem vacinas ou tratamentos específicos para a febre do Mayaro. Neste sentido, este trabalho teve como objetivo avaliar a produção de virus-like particles (VLPs) formadas por proteínas estruturais do MAYV. Dessa forma, foi realizada a clonagem da sequência de poliproteína estrutural de MAYV em vetor de expressão pPICZα A, a qual contém as proteínas do capsídeo, do envelope viral E1, E2 e E3, e a proteína 6k, em células competentes de Escherichia coli TOP10F por eletroporação. A seguir, foi realizada a extração do DNA plasmidial por lise alcalina e confirmação da transformação por PCR. A análise da PCR foi feita por eletroforese em gel de agarose 1% e a clonagem confirmada pela observação da banda no tamanho do inserto de 4256 pb. O DNA plasmidial extraído foi linearizado em reação de digestão com a enzima de restrição SacI e utilizado para transformação em levedura Komagataella phaffii KM71H via eletroporação. Com o objetivo final de aplicar as VLPs no desenvolvimento de um candidato vacinal nacional contra o vírus, além da confecção de novos kits diagnóstico. Portanto, considerando os últimos impactos causados por epidemias de arboviroses faz-se necessário o desenvolvimento de novas tecnologias que auxiliem na proteção da população mundial.
Palavras-chave Palavras-chaves: vírus Mayaro, virus-like particles, vacina.
Forma de apresentação..... Painel
Link para apresentação Painel
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