Resumo |
O câncer é a segunda doença que mais causa mortes no mundo, sendo responsável por 9,6 milhões de mortes global em 2018, o que corresponde a uma a cada seis mortes. Os tratamentos comumente usados no Sistema Único de Saúde (SUS), no Brasil, são a quimioterapia, radioterapia, e remoção cirúrgica. A quimioterapia é um dos principais métodos utilizados, apesar de alguns fármacos provocarem diversos efeitos colaterais no organismo. Além dos efeitos colaterais, a quimioterapia tem sua eficácia limitada em razão da resistência celular à alguns medicamentos, sendo esta uma das principais causas de falhas e desafios na luta contra o câncer. Um exemplo de fármaco utilizado na quimioterapia é a doxorrubicina (doxo), que apesar de ser considerado eficiente, pode culminar no desenvolvimento de resistência das células ao fármaco. Este estudo inicial, avaliou a citotoxicidade de linhagens de células humanas de câncer de mama e cólon retal (MCF-7, HT29 e SW480) ao tratamento com o fármaco doxorrubicina, para posteriormente submetê-las a ensaios de avaliação da resistência. As linhagens foram cultivadas em meio DMEM acrescido de 10% de soro fetal bovino e 1% de antibióticos, mantidas em garrafas apropriadas de crescimento a 37ºC, atmosfera de 5% de CO2 e 95% de umidade relativa. Para avaliar o efeito citotóxico da doxo, para cada linhagem foram realizados ensaios de citotoxicidade por MTT, utilizando placa de 96 poços e concentrações variadas da droga. A leitura da placa foi realizada no espectrofotômetro Spectramax a 570nm e as análises estatísticas no Software GraphPad Prism versão 5.01. No ensaio com concentrações entre 10 µM a 0,08 µM, a linhagem MCF7 se mostrou menos sensível a doxo do que as linhagens HT29 e SW480. Com o intuito de comparar o padrão de resposta das células sob altas e baixas concentrações, foi realizado ensaio de citotoxicidade por MTT com as linhagens HT29 e VERO, utilizando concentrações de 160 µM a 1,25 µM. Ambas linhagens apresentaram diminuição significativa (P < 0,05) da viabilidade celular em todas as concentrações testadas. Além disto, estas exibiram padrão de comportamento semelhante ao obtido no ensaio com concentrações menores, concentrações de 10, 5, 2,5 e 1,25 µM. A concentração necessária para matar 50% das células (IC50) de HT29 e VERO foram calculadas a partir do ensaio com maiores concentrações e o valor inferido foi de 0,34µM e 1,48 µM respectivamente. O Índice de seletividade (IS) da doxo sobre a linhagem HT29 foi de 4,4. Assim, uma vez que não foi possível a realização de mais ensaios, estes resultados indicaram uma resistência do câncer de mama à droga, ao passo que o câncer colorretal apresentou sensibilidade com elevada seletividade, quando comparada a linhagem normal. No entanto, novos ensaios são necessários para avaliar o mecanismo de resistência, entendê-lo e propor formas de minimizá-la a fim de acentuar o sucesso do tratamento do câncer de mama. |