Resumo |
O estudo objetivou avaliar o efeito da remoção do plasma seminal previamente à refrigeração do sêmen de garanhões da raça Mangalarga Marchador, por diferentes métodos (Experimento 1) e avaliar diferentes curvas de congelamento (Experimento 2) sobre a qualidade seminal nessa raça. Para ambos os experimentos, foram utilizados 9 garanhões hígidos em atividade reprodutiva, submetidos a coleta do ejaculado por meio de vagina artificial, sempre em duplicata. No experimento I, cada alíquota foi dividida em 3 grupos: Controle (CT) – Amostra diluída com Botusemen® na concentração de 50x106 espermatozoides / mL; Filtrado (FT) – Amostra diluída 1:1 com Botusemen®, posteriormente filtrada em Spermfilter® e resuspendida em Botusemen® na concentração de 50x106 espermatozoides / mL; Centrifugado (CF) - Amostra diluída 1:1 com Botusemen®, posteriormente centrifugada a 600 x g por 10 minutos e resuspendida em Botusemen® na concentração de 50x106 espermatozoides / mL. No experimento II, cada ejaculado após coletado foi processado para congelamento, utilizando Botucrio®, seguindo as normas recomendadas pelo fabricante. Posteriormente, a amostra foi dividida em 3 grupos: Curva Controle Caixa (CX) – Curva de -10o C / min de 5ºC a -60º C, seguida de curva de -8º C/min de -60ºC a -100o C; Rápida - Curva A (CA) – Curva de -10o C/min de 5º C a -60º C, seguida de curva de -25º C/min de -60º C a -120o C; Ultrarrápida - Curva B (CB) – Curva de -10o C/min de 5º C a -60º C, seguida de curva de -60º C/min de -60º C a -140o C. Para o descongelamento, os grupos foram subdivididos em 2, sendo descongelados a 37º C por 30 segundos (CX37; CA37; CB3K7), ou a 46º C por 20 segundos (CX46; CA46; CB46). A remoção de PS foi benéfica para a refrigeração de sêmen à 5o C quando se estende por 48h, sendo o método de centrifugação superior ao de filtragem por Spermfilter®. No entanto, para a refrigeração por 24h, não houve diferença entre remover ou não o PS da amostra para a maioria dos parâmetros seminais, mas a manutenção do PS na amostra, foi benéfica em minimizar o estresse oxidativo intracelular. Nas condições deste estudo, as curvas de congelamento estudadas demostraram ser iguais, não havendo diferença entre congelar o sêmen de garanhões da raça Mangalarga Marchador no congelamento manual ou no automático, seja na curva ultrarrápida ou rápida, quanto à cinética espermática. Além disso, não houve diferença quanto ao estresse oxidativo e estabilidade de membrana entre os métodos de congelamento, desde que se descongele as amostras à 37º C por 30 segundos. O descongelamento a 46º C por 20 segundos só é benéfico para o sêmen congelado em curva rápida (curva automática A). |