“Inteligência Artificial: A Nova Fronteira da Ciência Brasileira”
19 a 24 de outubro de 2020
Trabalho 13997
| ISSN | 2237-9045 |
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| Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
| Nível | Graduação |
| Modalidade | Pesquisa |
| Área de conhecimento | Ciências Biológicas e da Saúde |
| Área temática | Microbiologia |
| Setor | Departamento de Microbiologia |
| Bolsa | PIBIC/CNPq |
| Conclusão de bolsa | Sim |
| Apoio financeiro | CAPES, CNPq, FAPEMIG |
| Primeiro autor | Felipe Bastos de Carvalho |
| Orientador | DENISE MARA SOARES BAZZOLLI |
| Outros membros | Giarlã Cunha da Silva, Jéssica Nogueira Rosa, PATRICIA PEREIRA FONTES, Paulo Wilson Goulart |
| Título | Caracterização da produção de vesículas de membrana produzidas por Actinobacillus pleuropneumoniae em condições de aerobiose e anaerobiose |
| Resumo | Actinobacillus pleuropneumoniae (App) é uma bactéria Gram-negativa de morfologia cocobacilar, anaeróbia facultativa, encapsulada, pertencente à família Pasteurellaceae e agente causador da pleuropneumonia suína, uma doença infecto-contagiosa de caráter respiratório associada a importantes prejuízos na suinocultura mundial. Atualmente são reconhecidos 18 sorotipos de App e, portanto, com uma virulência complexa e multifatorial sorotipo-dependente. A produção de vesículas extracelulares por App contribui na virulência deste patógeno, por gerar lesões pulmonares típicas de pleuropneumonia por App. Deste modo, o objetivo deste trabalho foi avaliar a produção de vesículas extracelulares (EVs) produzidas por App em aerobiose e anaerobiose. Nesse contexto, App MIDG 2331, sorotipo 8 foi estudada. Em aerobiose, a bactéria foi inoculada em ágar BHI suplementado com NAD e a cultura foi incubada por 18 horas a 37 °C e 5% de CO2. Em anaerobiose, App foi inoculada em tubo tipo Hungate contendo 10 mL de caldo BHI-NAD previamente tratado com nitrogênio gasoso. As culturas foram incubadas por 24 horas a 37 °C, na presença e ausência de oxigênio, respectivamente, para a determinação das curvas de crescimento. As EVs foram extraídas no final da fase exponencial de crescimento para as duas condições de crescimento. Posteriormente, a cultura bacteriana foi centrifugada e o sobrenadante foi filtrado em membrana de 0,22 µm e submetido à filtração hidrostática para obtenção das EVs. A produção estimada de EVs foi realizada a partir da determinação do conteúdo proteico (μg/μl) pelo método de Bradford. O perfil de proteínas das EVs foi determinado por eletroforese em gel de poliacrilamida desnaturante 12% (SDS-PAGE). A partir das análises realizadas foi possível observar que na ausência de oxigênio o crescimento de App foi menor quando comparado com o crescimento em aerobiose, com curvas de crescimento específicas. Além disso, em anaerobiose houve uma redução considerável na produção das EVs, o que é proporcional a menor população microbiana obtida no mesmo tempo de análise e por possivelmente em um padrão de regulação da expressão dos genes envolvidos no processo de alongamento celular em anaerobiose, que afetam o perfil de expressão de genes, como lpoA envolvidos na biogênese de EVs em App. Para o perfil de proteínas totais foi observado diferença na abundância dessas proteínas nas duas condições avaliadas. Assim, é possível observar que as condições de crescimento influenciam a produção de EVs por App. Devido à pandemia por Covid-19 análises mais detalhadas sobre o tipo de EVs produzidas nas condições investigadas não foram realizadas, devido à necessidade de equipamentos mais sofisticados presentes em outros laboratórios da UFV e em outra Instituição como a UFOP. Com os resultados obtidos foi possível verificar que a produção de vesículas ocorre em condições de anaerobiose, situação semelhante ao ambiente hostil enfrentado no hospedeiro durante a infecção por App. |
| Palavras-chave | Pleuropneumonia suína, Vesículas extracelulares, Virulência |
| Forma de apresentação..... | Painel |
| Link para apresentação | Painel |
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