Resumo |
Cianobactérias são microrganismos procariontes que realizam fotossíntese oxigênica. São também capazes de absorver/metabolizar uma gama de compostos de nitrogênio (N), como nitrato, nitrito, amônia, ureia e aminoácidos. Algumas espécies conseguem ainda utilizar o nitrogênio atmosférico (N2), via fixação biológica de nitrogênio. Porém, a fonte e a concentração de N podem afetar diretamente o desenvolvimento desses organismos, causando desde reduções no crescimento até a inibição da diferenciação de heterócitos (células especializadas na fixação de N2) em linhagens heterocitadas. Considerando essas possíveis consequências, este trabalho teve por objetivo avaliar o crescimento da linhagem unicelular não fixadora de N2, Synechococcus elongatus PCC7942, cultivada em meios de cultura contendo diferentes fontes e concentrações de N, sob irradiância de 60 μmol·m-2·s-1, temperatura de 24 ± 2ºC e fotoperíodo de 16:8 h (dia:noite). A linhagem foi inicialmente cultivada em frascos do tipo Erlenmeyer (250 mL) contendo 125 mL de meio padrão (BG-11 – nitrato de sódio 18mM como fonte de N). Após 3 dias, 2 mL de célula foram mantidas nas demais condições de cultivo e transferidos para meios de cultura com diferentes fontes/concentrações de N, sendo: T1: BG-11 (18mM de NaNO3 – controle); T2: BG-110 (sem adição de N); T3: BG-110 + NaNO3 5mM; T4: BG-110 + NaNO3 10mM; T5: BG-110 + NH4Cl 5mM; T6: BG-110 + NH4Cl 10mM; T7: BG-110 + Ureia 5mM; T8: BG-110 + Ureia 10mM; T9: BG-110 + NH4NO3 5mM; T10: BG-110 + NH4NO3 10mM. Considerando-se as curvas de crescimento, não se observaram diferenças entre os tratamentos T1 (controle) e T4. No entanto, T1 apresentou maiores valores de taxa de máxima de crescimento µmáx e tempo de geração (TG) do que T4, respectivamente, 0,0400 e 17,3 h, e 0,0366 e 18,9 h. Os tratamentos nos quais amônia foi a fonte de N (T5, T6, T9 e T10) apresentaram as menores densidades ópticas (DO750nm), menores valores de µmáx e maiores TG, evidenciando uma possível toxicidade da amônia, desencadeada por alterações no pH e no gradiente eletroquímico entre os meios intra e extracelular. De forma interessante, os tratamentos T7 e T8 apresentaram resultados promissores em relação à utilização de ureia como fonte de N, com T7 permitindo crescimento da linhagem similar ao observado no tratamento controle, bem como µmáx de 0,0327 e TG de 21,2 h. Por apresentar baixos custos em relação a outras fontes de N, a ureia possibilitaria o cultivo em larga escala dessa linhagem. Saliente-se que esses resultados são base para a produção de meios de cultura visando a aplicação biotecnológica de cianobactérias, bem como para a seleção e engenharia genética de transformantes capazes de apresentar melhores respostas de crescimento em meios com maior concentração de N, permitindo sua aplicação em ambientes eutrofizados e em tratamento de efluentes. |