Ciência para a Redução das Desigualdades
16 a 18 de outubro de 2018
Trabalho 11039
| ISSN | 2237-9045 |
|---|---|
| Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
| Nível | Graduação |
| Modalidade | Pesquisa |
| Área de conhecimento | Ciências Biológicas e da Saúde |
| Área temática | Microbiologia |
| Setor | Instituto de Ciências Biológicas e da Saúde |
| Conclusão de bolsa | Não |
| Apoio financeiro | CNPq |
| Primeiro autor | Paloma Cavalcante Cunha |
| Orientador | MARLON CORREA PEREIRA |
| Outros membros | Anita Fernanda de Souza Teixeira , Fátima Maria de Souza Moreira, Lohany Idargo de Souza |
| Título | Isolamento e identificação de microrganismos associados ao sistema radicular de Cattleya milleri (Blumensch. ex Pabst) Van den Berg (Orchidaceae) |
| Resumo | A interação com microrganismos mutualistas é determinante para o crescimento e desenvolvimento de orquídeas na natureza. Eles proporcionam vias nutricionais e de defesa essenciais ao ciclo de vida de suas hospedeiras. O objetivo desse trabalho foi isolar e identificar bactérias diazotróficas (BDs) e fungos endofíticos (FEs) associados ao sistema radicular de Cattleya milleri (Orchidaceae), uma espécie rupícola endêmica do Brasil. Raízes de C. milleri foram coletadas de três populações nativas de afloramento rochoso (Nova Lima/ MG), e de plantas em casa de vegetação (Biofábrica, Vale SA, Nova Lima). As raízes foram agitadas em solução salina (NaCl 0,85%) para obter a suspensão de células rizosféricas (SCRs). As mesmas raízes foram submetidas à desinfestação superficial (imersão sucessiva em – etanol 70%, 1 min; solução 0,6% Cl-, 4 min; 3 lavagens em água estéril) e cortadas transversalmente para seleção de fragmentos com colonização fúngica. A SCRs e o macerado de parte dos fragmentos foram diluídos seriadamente. Para isolamento das bactérias, 100µL de cada diluição, assim como 5 fragmentos de raízes de cada amostra, foram inoculados no fundo de tubos com 10 mL de meio NFb semissólido. Os FEs foram isolados pela transferência dos cortes de raiz para placas com meio Batata Dextrose Ágar (BDA). As bactérias e os fungos foram caracterizadas culturalmente nos meios NFb sólido e BDA, respectivamente. Para identificação molecular, o DNA total das culturas foi extraído, o 16S das bactérias (primers 27F/ 1492R) e o ITS dos fungos (primers ITS1/ ITS4) foram amplificados e enviados para sequenciamento. Após analise da qualidade das sequências, os contigs foram construídos e classificados (fungos – banco de referência UTAX, USEARCH; bactérias – ferramenta Classifier, plataforma Ribossonal Database Project). Foram obtidas 35 culturas bacterianas (22 rizosférias e 13 endorizosféricas) e 22 culturas fúngicas. Treze bactérias formaram película quando reinoculadas em meio NFb semissólido, sendo consideradas BDs, ou seja, fixadoras de N. A sequência do 16S permitiu a classificação de 11 bactérias como Proteobactérias: 4 do gênero Pseudomonas, 2 Burkholderia, 2 Methylobacterium, 1 Enterobacter, 1 Rhodopseudomonas e 1 Variovorax. Pseudomonas e Burkholderia são bactérias associativas típicas de plantas e relatadas como simbiontes de orquídeas. Seis grupos morfológicos de fungos foram observados. Sete isolados foram classificados como pertencentes ao filo Basidiomycota (6 Tulasnella spp. e 1 da ordem Sebacinales) e cinco como Ascomycota (4 da ordem Pleosporales e 1 Saccharomycetales). O maior número de isolados Tulasnella corrobora com a literatura, que descreve maior interação simbiótica das orquídeas com fungos rizoctonioides. A técnica molecular permitiu a identificação da maioria dos isolados, mas mais estudos devem ser realizados para classificação dos isolados não identificados em nível de gênero. Suporte financeiro: CNPq. |
| Palavras-chave | Fungos endofíticos, bactérias diazotróficas, diversidade |
| Forma de apresentação..... | Painel |