| Resumo |
A inflamação é a resposta do organismo a lesões teciduais, envolvendo mediadores químicos e espécies reativas de oxigênio (EROs). O desequilíbrio na produção dessas substâncias pode prolongar a inflamação, causando danos celulares e um ciclo que perpetua o processo inflamatório. Diferentes intervenções terapêuticas têm sido estudadas para tratar patologias inflamatórias, destacando-se os extratos vegetais com ações antioxidantes e anti-inflamatórias. O eugenol (4-alil-2-metoxifenol), presente no óleo de cravo-da-índia, e seus derivados, como o bis-eugenol e o óleo essencial, são conhecidos por essas propriedades. O objetivo deste estudo foi comparar os efeitos anti-inflamatórios e de proteção celular dessas substâncias, em diferentes concentrações, em macrófagos RAW 264.7. A princípio, foram obtidos os compostos de interesse, sendo o eugenol adquirido de fornecedor comercial, o bis-eugenol foi sintetizado em laboratório a partir do eugenol por reação de oxidação e o óleo essencial de cravo-da-índia (Syzygium aromaticum) foi extraído por destilação a vapor dos botões florais, seguido de extração. Adiante, foram conduzidos experimentos in vitro para análise de viabilidade celular antes e após estresse oxidativo induzido por H₂O. Os macrófagos RAW 264.7 foram tratados com os compostos em diferentes concentrações, sendo selecionadas as doses de 10 e 25 μg/mL para indução inflamatória. Em seguida, realizou-se extração de RNA, síntese de cDNA e PCR Real Time, utilizando marcadores de citocinas pró e anti-inflamatórias. A análise estatística foi realizada no GraphPad Prism 8.0. A normalidade dos dados foi avaliada pelo teste de Kolmogorov-Smirnov e, quando atestada, as comparações entre grupos foram feitas por ANOVA – seguida do teste de Tukey (p < 0,05). Com efeito, todos os compostos não apresentaram diferenças significativas na viabilidade celular quando comparados ao grupo controle. A viabilidade celular foi mantida acima de 70% sob estresse oxidativo induzido por H₂O₂, sendo o BIS25 o que apresentou o maior efeito protetor. A expressão de TLR-4 e NF-κB foi significativamente reduzida em todos os grupos experimentais em relação ao controle positivo, com EU10, BIS25 e OE25 apresentando as maiores reduções em TLR-4, e BIS25 e OE25 destacando-se na inibição de NF-κB. A expressão de NRF2 foi aumentada em BIS25, enquanto EU10, EU25 e BIS10 reduziram seus níveis em comparação ao controle positivo. Em relação à IL-10, BIS25 elevou sua expressão, OE10 manteve níveis similares ao controle positivo, e os demais grupos apresentaram redução. Conclui-se que o bis-eugenol (25 μg/mL) apresentou efeitos anti-inflamatórios mais pronunciados, ao inibir simultaneamente as vias TLR4 e NF-κB e ativar NRF2 e IL-10. Sua estrutura química confere maior estabilidade, contribuindo para sua eficácia na proteção celular e modulação inflamatória. Ressalta-se que investigações adicionais são necessárias para elucidar seu papel primário na mediação desses efeitos. |