Resumo |
O gênero Capsicum (Solanaceae) é constituído de espécies de pimentas e pimentões, cultivadas e silvestres, e originadas das Américas do Sul e Central. Capsicum annuum L., Capsicum baccatum L. e Capsicum frutescens L. são incluídas dentre as espécies cultivadas e seus frutos são importantes em muitos países como especiarias, o que atribui valor econômico ao produto. Sendo assim, esse trabalho teve como objetivo mensurar o conteúdo de DNA nuclear de C. annuum, C. baccatum e C. frutescens, comparando os valores médios entre as espécies, percebendo possíveis diferenças e contribuindo com base teórica para estudos futuros. O conteúdo do DNA nuclear foi mensurado utilizando Solanum lycopersicum L. com 2C = 2,0 pg como padrão interno. Fragmentos foliares de cada espécie e do padrão foram retalhados por 30 s em solução de 0,5 mL do tampão de extração OTTO-I, suplementado com 50 µg mL−1 RNAse (Sigma®) e 2 mM dithiothreitol (Sigma®), pH 2,3. 0,5 mL de OTTO-I foi adicionado em cada suspensão. As suspensões foram homogeneizadas e filtradas em nylon de 30 μm (Partec®). As suspensões foram centrifugadas a 1.100 rpm por 5 min, o precipitado foi ressuspendido em 100 μL de OTTO-I e incubado por 10 min. Para o procedimento de coloração, 1.5 mL de OTTO-II foram adicionados ao precipitado e incubado no escuro em temperatura ambiente. Após 30 min, as suspensões nucleares foram filtradas em nylon de 20 µm e analisadas em um citômetro de fluxo BD Accuri C6 (Accuri cytometers, Belgium) que possui laser 488 nm de 50 mW para detectar emissões em comprimentos de onda no FL2 e FL3. Quatro repetições foram conduzidas para cada espécie. O conteúdo de DNA nuclear foi mensurado dividindo o canal médio do pico de fluorescência correspondente aos núcleos G0/G1 do padrão pelo de cada amostra. A análise dos histogramas foi feita com o BD CSamplerTM. Os valores 2C médios demonstraram que C. annuum possui 2C = 3,813 pg, C. baccatum 2C = 4,150 pg e C. frutescens 2C = 3,578 pg. Com base nos resultados, nós percebemos que há diferenças no conteúdo de DNA nuclear entre as espécies, o que indica variações interespecíficas do tamanho do genoma nuclear. Os resultados previamente apontados para as espécies (C. annuum com 2C = 3,16 pg, C. baccatum 2C = 3,71 pg e C. frutescens 2C = 3,40 pg) também evidenciam essa variação, a qual representa a base para investigações cariotípicas que visam identificar as mudanças genômicas que ocorreram ao longo da diversificação e especiação. Portanto, nosso estudo é um passo importante para caracterização comparativa do cariótipo das espécies. |