"A Transversalidade da Ciência, Tecnologia e Inovações para o Planeta"

5 a 7 de outubro de 2021

Trabalho 15796

ISSN 2237-9045
Instituição Universidade Federal de Viçosa
Nível Graduação
Modalidade Pesquisa
Área de conhecimento Ciências Agrárias
Área temática Agronomia
Setor Departamento de Agronomia
Conclusão de bolsa Não
Apoio financeiro Outros
Primeiro autor Maria Helena Correia Lima de Mendonça Pereira
Orientador MARCIO HENRIQUE PEREIRA BARBOSA
Outros membros Milene Figueiredo
Título Detecção de Leifsonia xyli subsp. xyli em mudas de cana-de-açúcar tratadas termicamente
Resumo O setor sucroenergético contribui de forma significativa para o PIB brasileiro, tornando a cana-de-açúcar uma cultura de grande importância para o país. Dentre as inúmeras doenças que atacam a cana, o raquitismo-das-soqueiras, causado pela bactéria Leifsonia xyli subsp. xyli, é uma doença de difícil identificação e com ausência de sintomas visíveis. Ela pode causar sérios danos sem ser percebida, com prejuízos que podem superar um milhão de dólares. Desta forma, o presente trabalho tem como objetivo avaliar o desempenho da técnica Nested-PCR (nPCR) para detecção de Leifsonia xyli subsp. xyli em mudas de cana-de-açúcar para a obtenção de um método de diagnóstico sensível e específico. Para a extração do DNA genômico, foram coletados e macerados colmos de três genótipos, UFV062066, CB49-260 e RB867515, tratados termicamente e que apresentavam sintomas de escaldadura-das-folhas, doença causada por outra bactéria, Xanthomonas albilineans. Para a validação e otimização da PCR (Reação em cadeia da polimerase), foram realizadas análises das condições ideais para as reações seguindo as recomendações do fabricante (Agilent®). Esse processo foi feito inicialmente para os pares de primers externos (CxyliF – CxyliR) e, em seguida, com o produto da primeira reação diluído 1/10, para os internos (NCxyliF e NCxyliR). Para visualização dos resultados, foram feitos géis tanto de poliacrilamida, quanto de agarose, com os quais verificou-se formação de banda apenas para a amostra do genótipo UFV062066 para todas as temperaturas testadas. A reação com os primers externos apresentou um fragmento nítido com 520bp a 58,4º C, enquanto a reação com os primers internos apresentou um fragmento com 229bp a 59,6º C. Com os resultados obtidos, a nPCR demostrou ser uma técnica eficaz e específica na detecção do patógeno. Foi possível constatar que os primers analisados nesse estudo amplificaram apenas o DNA da Leifsonia xyli subsp. xyli, não havendo amplificação do DNA da cana-de-açúcar. Estudos prospectivos serão realizados com um número maior de genótipos da cana-de-açúcar com o intuito de validação do método nPCR.
Palavras-chave cana-de-açúcar, raquitismo-das-soqueiras, marcadores moleculares
Forma de apresentação..... Painel
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