Resumo |
O gênero Capsicum possui 5 espécies de pimentas domesticadas, dentre elas, Capsicum chinense, a qual é produzida e consumida no Brasil. C. chinense apresenta considerável variabilidade genética, que resulta, por exemplo, na diferença de cores, formatos e até níveis de picância dos frutos. Assim, estudos genéticos são necessários de modo a auxiliar programas de melhoramento vegetal para fins econômicos, bem como para estudos de taxonomia e filogenia. Dessa forma, o presente trabalho foi realizado com o objetivo de caracterizar o cariótipo e mensurar o conteúdo de DNA nuclear de C. chinense. Meristemas radiculares de C. chinense foram tratados com 4 µM de amiprofos-metil (Sigma®), ou 3, 4 ou 5 µM de dinitroalinina (Sigma®) suplementados com 0,3% de dimetilsulfóxido, e fixadas com metanol: ácido acético (3:1). Os meristemas radiculares foram excisados, macerados em pool enzimático (4% de celulose Yakult + 2,0% de celulose Sigma® C1184 + 0,4% de hemicelulase Sigma® H077 + 0,5% de macerozime Orozuka R10 Yakult), diluído em solução tampão citrato (ácido cítrico 10 mM + citrato trissódico 10 mM, pH = 4,8) na proporção de 200:10 (tampão: pool enzimático) suplementado com 1 μL de pectinase (Sigma®), e fixados. As lâminas foram preparadas por meio da dissociação celular e secagem ao ar, e coradas com Giemsa 5% (Merck®). O mensuramento do valor 2C nuclear foi conduzido a partir de fragmentos foliares de C. chinense, os quais foram retalhados juntamente com o padrão de referência Solanum lycopersicum (2C = 2,0 pg), por 30 s em 0,5 mL do tampão de extração. As suspensões nucleares foram coradas com iodeto de propídeo e analisadas em citômetro de fluxo BD Accuri C6 (Accuri cytometers, Belgium) equipado com laser 488 nm de 50 mW e filtros de detecção de fluorescência. Quatro repetições foram realizadas, contabilizando pelo menos 10.000 núcleos por repetição, e o conteúdo de DNA foi mensurado dividindo o canal médio do pico de fluorescência correspondente aos núcleos G0/G1 do padrão pelo de cada amostra. C. chinense possui 2n = 2x = 24 cromossomos, corroborando com a ploidia reportada na literatura para o gênero Capsicum. A espécie apresenta 11 pares de cromossomos metacêntricos, e 1 par submetacêntrico, e dois cromossomos com constrição secundária, assim como reportado por diferentes autores. O valor 2C nuclear médio de C. chinense é 2C = 3,493 pg. O valor 2C nuclear de 3,42 pg para C. chinense foi revisitado na bibliografia, indicando não haver variação intraespecífica do tamanho do genoma. Portanto, o presente estudo confirmou a estabilidade cariotípica de C. chinense, indicando que outras abordagens genéticas devem ser conduzidas a fim de identificar as causas das variações fenotípicas notificadas entre os indivíduos. |