"A Transversalidade da Ciência, Tecnologia e Inovações para o Planeta"
5 a 7 de outubro de 2021
Trabalho 15517
| ISSN | 2237-9045 |
|---|---|
| Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
| Nível | Pós-graduação |
| Modalidade | Pesquisa |
| Área de conhecimento | Ciências Agrárias |
| Área temática | Genética |
| Setor | Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular |
| Bolsa | CAPES |
| Conclusão de bolsa | Não |
| Apoio financeiro | CAPES |
| Primeiro autor | Sâmera de Souza Breves |
| Orientador | ELIZABETH PACHECO BATISTA FONTES |
| Outros membros | Marco Aurélio Ferreira, Ruan Maloni Teixeira, Thainá Fernanda Fillietaz Saia |
| Título | Eficácia da imunidade antiviral mediada por NIK1 contra vírus de RNA |
| Resumo | Introdução- NIK 1 (NSP-interacting Kinase 1) é um receptor de membrana que reconhece PAMPs (Pathogen-associated molecular patterns) virais, direcionando a fosforilação na Treonina 474 que estimula a atividade de quinase e fosforila a proteína ribossomal RPL10. A proteína RPL10 fosforilada é translocada do citoplasma para o núcleo celular e interage com a proteína LIMYB (L10- interacting Myb domain-containing protein) que inibe a atividade dos promotores de genes ribossomais e genes relacionados à maquinaria de tradução suprimindo a tradução global. Os mecanismos de imunidade conferidos por NIK1 têm mostrado ser efetivos na defesa contra vírus de RNA como o Tobbaco rattle virus (TRV), que é um vírus membro da família Trobavirus. O genoma de TRV é constituído de RNA fita simples no sentindo positivo, sendo formado por dois componentes genômicos: TRV RNA1 e TRV RNA2. TRV RNA1 confere a capacidade ao vírus de se replicar e espalhar na planta hospedeira e TRV RNA2 codifica a proteína do capsídeo conhecido como “nematode-transmission factor” Objetivo- Verificar se a via de ativação de NIK1 é efetiva contra vírus de RNA. Métodos- Foi inoculado os componentes genômicos TRV1 e TRV2 em Nicotiana benthamina. As plantas infectadas foram confirmadas por PCR e o vírus foi transferido para Arabidopsis mecanicamente. Os genótipos de Arapidopsis utilizados foram Col 0 (Wild type), linhagem nocaute nik 1 e linhagem NIK1-5 complementada e, após o ensaio de infecção, RNA total foi extraído e utilizada na síntese de cDNA para avaliar o número de transcritos e cópias virais via RT-qPCR. Para avaliar o nível de expressão dos genes ribossomais via RT-qPCR, foram utilizados genótipos Col 0 (wild type), T474D, nik 1, nik 2 e nik1/nik2 imersos em RNA viral extraídos de plantas infectadas com TRV, água e RNA de plantas não infectadas. Resultados- O resultado do ensaio de infecção mostrou que plantas nocautes nik1 foram mais suscetíveis ao TRV do que Col 0 (wild type) e NIK1-5, sendo um indicativo de que o TRV pode ativar a defesa antiviral por NIK1. Em relação ao nível de expressão de genes ribossomais, as plantas infectadas mostraram um nível de expressão inferior daquele de plantas nocautes e de plantas tratadas com água e RNA de plantas não infectadas. Conclusão- Os resultados indicam que NIK1 é ativado por Tobacco rattle virus (TRV) um vírus de RNA que pode estimular mecanismo similar de ativação da via antiviral mediada pelo receptor de membrana NIK1 causado por Begomovirus. |
| Palavras-chave | Receptor imune, vírus de RNA, genes ribossomais |
| Forma de apresentação..... | Vídeo |
| Link para apresentação | Vídeo |
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