"A Transversalidade da Ciência, Tecnologia e Inovações para o Planeta"

5 a 7 de outubro de 2021

Trabalho 15215

ISSN 2237-9045
Instituição Universidade Federal de Viçosa
Nível Pós-graduação
Modalidade Pesquisa
Área de conhecimento Ciências Agrárias
Área temática Genética
Setor Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular
Bolsa CAPES
Conclusão de bolsa Não
Apoio financeiro CAPES
Primeiro autor Thainá Fernanda Fillietaz Saia
Orientador ELIZABETH PACHECO BATISTA FONTES
Outros membros Ruan Maloni Teixeira, Sâmera de Souza Breves
Título LIMYB, um componente a jusante da via de sinalização antiviral de NIK1, é fosforilada em resposta a sinais de estresses e de desenvolvimento.
Resumo Introdução-LIMYB (L10-Interacting Myb Domain-Containing Protein), uma proteína nuclear que possui dois domínios MYB/SANT-like pertencente à familia MYB, participa da via de defesa antiviral mediada por NIK1 (NSP-interacting kinases) em plantas contra Begomovirus. NIK1 é um receptor de membrana que pertence superfamília de RLK (receptor-like kinase). NIK1 foi descoberto por interagir com a proteína viral nuclear shuttle protein (NSP) o que impede uma resposta efetiva contra a infecção viral. NIK1 é responsável pela sinalização do sistema imune antiviral de planta, sendo ativada por meio da percepção de elicitores virais promovendo homodimerização ou heterodimerização deste receptor, e subsequente fosforilação no resíduo de treonina na posição 474. Os elicitores de NIK1 já caracterizados sao PAMPs virais, ácidos nucleicos de begomoviruses, e PAMPs antibacterianas, como a flagelina bacteriana (Flg 22). A ativação de NIK1 desencadeia uma cascata de fosforilação resultando na fosforilação da PROTEÍNA RIBOSSOMAL L10 (RPL10) que, como consequência, direciona-se para o núcleo. No núcleo, L10 interage com LIMYB, que se liga aos promotores e reprime a expressão de genes da maquinaria de tradução, levando à supressão global da tradução. O mRNA viral não é eficientemente traduzido, comprometendo a infecção. Devido a sua importância na via de NIK1, estudos da função biológica de LIMYB podem contribuir significativamente para estudos de imunidade e desenvolvimento em plantas. Por exemplo, não se sabe se LIMYB tem de ser ativada por fosforilação para reprimir a expressão de genes de tradução Objetivo- investigar quais os estresses bióticos e abióticos induzem a fosforilação de LIMYB. Métodos A análise da indução da fosforilação de LIMYB por ácidos nucleicos de begomovirus e flagelina bacteriana (Flg22) foi realizada por ensaio in vivo com plantas Arabidopsis thaliana limyb Salk_032054 (nocautes), linhagens overxpressando LIMYB e plantas selvagens. As sementes foram plaqueadas separadamente em placas de petri contendo meio MS 1/2 força. As plântulas foram cultivadas a 22℃ por 12 dias, e aclimatadas por um dia em água, e consequentemente induzidas a tratamentos, utilizando separadamente DNA e RNA extraídos de plantas infectadas por begomovirus e não infectadas e Flg 22, em concentração de 250 ng/µL, por um período de 3 horas. Foi realizada a extração da proteína e análise por western blot. Resultados- LIMYB é fosforilada por diferentes estímulos, tanto por ácidos nucleicos como por flg22. Conclusão- Os estudos realizados com LIMYB indicam sua participação em processos de proteção contra estresses bióticos e estudos estão em progressos para analisar se estímulos abióticos causam fosforilação de LIMYB, conforme o padrão de ativação de NIK1.
Palavras-chave Biologia Molecular de plantas, Proteína, Imunidade Antiviral.
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