Resumo |
Introdução: A cicatrização de feridas é um processo fisiológico essencial envolvendo proliferação e migração celular, que irão estimular processos e substituir estruturas danificadas, restaurando a integridade do tecido. Durante a cicatrização, os macrófagos executam diferentes tarefas tanto na inflamação como na fase proliferativa, estimulando a geração de fatores de crescimento, síntese de proteínas e quimiotaxia. Atualmente cresce a procura por produtos naturais que possuam potencial terapêutico. Neste contexto, podemos destacar os extratos vegetais, dentre eles a Maclura tinctoria (M. tinctoria) que possui ação antirreumática, anti-inflamatória, anti-malárica e anti-fungica. Objetivo: investigar o efeito do extrato diclorometânico da folha de M. tinctoria (DcMt), no potencial de migração de macrófagos Raw264.7. Material e métodos: O potencial do extrato das folhas de M. tinctoria de estimular a migração das células foi testado através de um ensaio de cicatrização in vitro (Wound Healing Assay ou In vitro Scratch Assay). Macrófagos Raw264.7 foram plaqueados (2x105células/poço), em placas de 24 poços contendo Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) suplementado com 10% de Soro Fetal Bovino (SFB). Os cultivos foram incubados overnight (37°C e 5% CO2). Após esse período, uma arranhadura foi feita na monocamada com a ponta de uma ponteira de pipeta automática de 200µl, estéril. Os detritos celulares foram removidos por lavagem com PBS. Logo após as células foram tratadas com DcMt (25 e 50µg/mL). O controle positivo recebeu DMEM suplementado com 10% SFB e o controle negativo recebeu DMEM suplementado com 10% SFB e DMSO (0,4%). Todos os ensaios foram realizados em triplicatas. Foi adicionado ao meio de cultura mitomicina C (10µg/mL) para que somente a migração celular fosse avaliada. As imagens foram capturadas por câmera acoplada ao microscópio invertido, imediatamente após a lesão (0h) e após 24h (24h), e analisadas através do programa Image J versão 1.42q. Resultados: Os resultados demonstraram que houve aumento significativo na taxa de migração celular nas concentrações de 25 e 50 μg/mL do extrato de DcMt em relação ao controle negativo com DMSO. Conclusão: O extrato da folha de M. tinctoria com diclorometano mostrou-se eficiente no estímulo da atividade migratória de macrófagos Raw264.7, principalmente na concentração de 25µg/mL, indicando um potencial cicatrizante uma vez que a migração celular é um fator limitante no processo de reparo tecidual. |