Fome e Abundância: Um Paradoxo Brasileiro?
17 a 22 de outubro de 2016
Trabalho 7145
| ISSN | 2237-9045 |
|---|---|
| Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
| Nível | Pós-graduação |
| Modalidade | Pesquisa |
| Área de conhecimento | Ciências Biológicas e da Saúde |
| Área temática | Biotecnologia |
| Setor | Departamento de Veterinária |
| Bolsa | CAPES |
| Conclusão de bolsa | Não |
| Apoio financeiro | FAPEMIG |
| Primeiro autor | Cíntia Fernandes Fidelis |
| Orientador | MARLENE ISABEL VARGAS VILORIA |
| Outros membros | JOAQUIN HERNAN PATARROYO SALCEDO, Leandro Silva de Araújo |
| Título | Pesquisa e desenvolvimento de kits de imunodiagnóstico pela tecnologia Flow-Through para o diagnóstico do protozoário Neospora caninum |
| Resumo | A neosporose bovina, causada pelo protozoário Neospora caninum, é reconhecida como uma das maiores causas de aborto e perdas neonatais em bovinos de leite e corte em todo o mundo. No que tange aos métodos de diagnósticos da neosporose bovina no Brasil, o diagnóstico é principalmente realizado através de imunofluorescência indireta (RIFI) ou através de imunohistoquímica, métodos que demandam uso de equipamentos laboratoriais e mão de obra especializada. Com isso nos últimos anos esta doença tem atraído o interesse de pesquisadores com foco no diagnóstico e controle desta enfermidade. Nesse sentido este trabalho visa o desenvolvimento de métodos de imunodiagnóstico rápido para identificação de animais soropositivos pela técnica Flow-Through, a fim de disponibilizar no Brasil tecnologias de diagnóstico rápido, simples, a preços mais acessíveis e com igual confiabilidade aos testes preconizados pelos órgãos internacionais. Para a construção da plataforma de imunodiagnóstico foi produzido um peptídeo recombinante rNcGRA1, a ser usado como antígeno, desenhado a partir de proteínas de grânulos denso do parasito, contendo sequências imunodefinidas pela metodologia de genética reversa de epítopos antigênicos e otimizadas para expressão extracelular em leveduras Pichia pastoris. Os antígenos produzidos de forma recombinante foram testados pelas metodologias de ELISA e Dot-ELISA utilizando soros policlonais anti-Neospora caninum. Dessa forma foram feitos testes iniciais com o antígeno produzido utilizando a plataforma Rapid Flow-Through (MedMira) e soros de bovinos infectados naturalmente. A produção do peptídeo recombinante rNcGRA1 expresso em leveduras Pichia pastoris e purificado foi capaz de produzir antígenos de boa qualidade e bom rendimento. Os resultados desse experimento mostraram que o soro policlonal anti-Neospora caninum, em várias diluições, reagiu com o antígeno produzido, assegurando sua especificidade. Os ensaios iniciais com a plataforma teste utilizando soros positivos de animais naturalmente infectados já demonstram boa sensibilidade e especificidade do ensaio. Dessa forma os ensaios iniciais com a metodologia through flow já demonstraram indícios de resultados satisfatórios, sendo assim uma alternativa promissora para o diagnostico da Neosporose bovina. |
| Palavras-chave | Neospora caninum, Neosporose Bovina, Imunodiagnóstico flow-through. |
| Forma de apresentação..... | Painel |