Fome e Abundância: Um Paradoxo Brasileiro?
17 a 22 de outubro de 2016
Trabalho 6972
| ISSN | 2237-9045 |
|---|---|
| Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
| Nível | Pós-graduação |
| Modalidade | Pesquisa |
| Área de conhecimento | Ciências Biológicas e da Saúde |
| Área temática | Biotecnologia |
| Setor | Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular |
| Bolsa | CAPES |
| Conclusão de bolsa | Não |
| Apoio financeiro | CAPES, CNPq |
| Primeiro autor | Fernanda Sales de Araújo |
| Orientador | CLAUDIO LISIAS MAFRA DE SIQUEIRA |
| Outros membros | EDVALDO BARROS, HUMBERTO JOSUE DE OLIVEIRA RAMOS, Paolla Mara Dellabrida de Andrade e Faria, PEDRO MARCUS PEREIRA VIDIGAL |
| Título | Abordagem proteômica do intestino de carrapatos Amblyomma sculptum machos e fêmas não alimentados |
| Resumo | Os carrapatos são artrópodes hematófagos obrigatórios, sendo a espécie Amblyomma sculptum amplamente distribuída nas regiões Sul e Sudeste do Brasil, considerada de grande importância médico-veterinária. O intestino dos carrapatos realiza a digestão intracelular dos componentes do sangue obtidos de hospedeiros, permitindo o armazenamento de grande quantidade de alimento, úteis para o seu desenvolvimento, e facilitando a propagação de diversos agentes causadores de doença, os quais podem ser transmitidos ao hospedeiro durante o repasto sanguíneo. Para uma melhor compreensão sobre a biologia e as moléculas fundamentais envolvidas no metabolismo desse importante artrópode, o objetivo geral deste trabalho foi identificar e caracterizar as proteínas diferencialmente expressas em intestinos de carrapatos A. sculptum, machos e fêmeas não alimentados, utilizando ferramentas proteômicas. Na metodologia, 180 carrapatos machos e 180 fêmeas adultos não alimentados, livres de patógenos, foram obtidos do Laboratório de Ixodologia da UFU. Os carrapatos foram dissecados e os intestinos armazenados em solução de lise e congelados a -80ºC. As proteínas totais foram extraídas e sua concentração determinada pelo método de Bradford. Essas proteínas foram separadas por SDS-PAGE 1D e, após a sua detecção, as canaletas foram fracionadas e submetidas à digestão enzimática com tripsina. Os peptídeos trípticos obtidos foram ressuspendidos e aplicados em um sistema nanoUPLC-MS/MS, cuja corrida cromatográfica ocorreu em uma coluna trap e uma coluna capilar, sendo os peptídeos eluídos injetados automaticamente e analisados em um espectrômetro de massas Ion Trap. A aquisição de dados foi gerenciada com o aplicativo Data Analysis e as listas de massas obtidas foram confrontadas contra o banco de dados de proteínas Chelicerata (UNIPROT), utilizando o aplicativo MASCOT. O resultado obtido pelo MASCOT foi validado pelo aplicativo Scaffold e as planilhas geradas foram verificadas e agrupadas, considerando pelo menos duas sequências de peptídeos e FDR menor que 1% para cada proteína identificada. A classificação funcional das proteínas foi feita por meio da comparação com proteínas ortólogas depositadas no banco KOG. Como resultado parcial, foram identificadas 48 proteínas, dentre elas, 56% apresentaram classificação funcional vinculada ao processamento celular, sinalização e metabolismo. Das proteínas vinculadas ao metabolismo, a catalase e a fructose-biphosphate aldolase foram encontradas em maior abundância nas fêmeas, enquanto, as proteínas ATP synthase subunit beta (Fragment), putative formyltetrahydrofolate dehydrogenase, putative oligomycin sensitivity-conferring protein (Fragment) e putative tpa exp: fatty acid-binding protein fadp (Fragment) nos machos. Conclui-se que há indícios de diferenças na expressão proteica no intestino entre machos e fêmeas de carrapatos A. sculptum. |
| Palavras-chave | Proteômica, Intestino, Amblyomma sculptum |
| Forma de apresentação..... | Painel |