Resumo |
Staphylococcus são bactérias capazes de aderir à superfícies bióticas e abióticas e formar biofilmes, tornando as células mais protegidas da ação de agentes antimicrobianos e dificultando sua remoção. Células liberadas do biofilme podem se constituir em importante fonte de contaminação de alimentos, comprometendo a qualidade e a segurança dos mesmos. O objetivo desse trabalho foi verificar a interferência da bacteriocina nisina, produzida por Lactococcus lactis, associada aos sanitizantes hipoclorito de sódio e ácido peracético, em concentrações subinibitórias, sobre o crescimento e a formação de biofilmes por estirpes de Staphylococcus spp. As estirpes de S. aureus COL, FRI 722 e Embrapa 4018 e S. epidermidis ATCC 35984 foram inoculadas em meio LB e cultivadas em cultura pura e em cultura mista, composta pela junção das espécies. O ensaio foi realizado em microplacas de 96 poços na presença de concentrações subinibitórias dos antimicrobianos sozinhos ou combinados entre si. Os biofilmes foram formados durante 46 h de incubação à 37 ºC e, após esse período, foi realizada a leitura da densidade óptica a 600 nm (DO600nm) para determinar o crescimento. O conteúdo da microplaca foi descartado restando assim, apenas o biofilme. A mensuração de células sésseis foi feita por leitura de DO 590nm após as microplacas serem lavadas com PBS e coradas com cristal violeta 0,1 % (m/v). Os resultados foram expressos por meio da relação entre a DO 590nm do extrato de cristal violeta (células sésseis) e a DO 600nm de células totais (células sésseis e planctônicas). Os resultados mostraram que culturas multiespécies parecem formar mais biofilmes quando comparadas com culturas puras. A bacteriocina nisina foi mais efetiva para inibir a formação de biofilme de S. epidermidis ATCC 35984, entretanto, foi capaz de reduzir a formação de biofilme das estirpes de S. aureusavaliadas. Os sanitizantes utilizados não foram capazes de reduzir a formação de biofilme dessas espécies e, quando combinados com nisina, efeito antagônico sobre a formação de biofilmes foi observado. |