Resumo |
Mycoplasma hyopneumoniae (Mhyop) é o agente primário causador da pneumonia enzoótica, uma doença respiratória endêmica e responsável por perdas econômicas significativas na indústria de suínos. Além disso, o desenvolvimento da pneumonia enzooótica aumenta a susceptibilidade do hospedeiro a outros patógenos respiratórios e infecções secundárias. Nesse contexto, o objetivo desse trabalho foi testar três protocolos distintos para o isolamento de Mycoplasma hyopneumoniae. Foram coletadas em frigorífico da região da Zona Da Mata de Minas Gerais, 103 amostras de pulmão de suínos com lesões sugestivas de pneumonia enzoótica. Todos os três protocolos utilizam o meio Friis, com modificações. O fragmento de pulmão coletado foi seccionado em três partes de apoximadamente 1 cm³, sendo cada parte direcionada para um determinado protocolo. De modo geral, as amostras foram maceradas, centrifugadas, filtradas, adicionadas de 1,8 mL do meio líquido e realizadas diluições decimais. Os tubos eram incubados em agitador controlado na rotação de 180 RPM a 37°C e observados durante 30 dias, para visualizar a mudança de cor. Somente foram utilizadas para a semeadura em meio sólido as amostras que verteram após a terceira passagem. O protocolo III mostrou os melhores índices de crescimento. Do total, foram 172 amostras para a terceira passagem, dessas, 40,7% (70/172) verteram o meio e foram plaqueadas. Em 19 (27%) dessas placas foram observadas colônias com suspeita de Mycoplasma spp. Para todas essas amostras foi feita a extração de DNA e em seguida PCR de identificação para Mhyop. Apenas cinco amostras apresentaram banda similar ao controle positivo. O material do PCR foi enviado para o sequenciamento e nenhuma das suspeitas tiveram homologia com Mhyop. O isolamento de Mycoplasma hyopneumoniae é muito fastidioso e requer um longo período de incubação, além de normalmente ser co-isolado com Mycoplasma hyorhini. Devido a isso, outras técnicas de diagnósticos são necessárias para a identificação do agente. |