Fome e Abundância: Um Paradoxo Brasileiro?
17 a 22 de outubro de 2016
Trabalho 6123
| ISSN | 2237-9045 |
|---|---|
| Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
| Nível | Graduação |
| Modalidade | Pesquisa |
| Área de conhecimento | Ciências Biológicas e da Saúde |
| Área temática | Genética e Melhoramento Vegetal |
| Setor | Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular |
| Bolsa | CNPq |
| Conclusão de bolsa | Sim |
| Apoio financeiro | CNPq, FAPEMIG |
| Primeiro autor | Hanna Durso Neves Caetano |
| Orientador | ELIZABETH PACHECO BATISTA FONTES |
| Outros membros | Maiana Reis Pimenta, Paola de Avelar Carpinetti, Priscila Alves da Silva |
| Título | Análise funcional do gene GmNAC081 durante o processo de senescência natural |
| Resumo | A senescência foliar é um processo essencial do desenvolvimento da planta, controlado tanto por fatores genéticos quanto ambientais. Este processo é desencadeado por uma massiva reprogramação da expressão gênica, porém informações funcionais acerca de seus mecanismos reguladores subjacentes ainda são limitadas. O fator de transcrição de soja GmNAC081 é um componente a jusante de uma via de sinalização que promove morte celular programada e senescência foliar em resposta a estresses osmótico e do retículo endoplasmático. Foi comprovado que este fator de transcrição, juntamente com outros componentes da via de sinalização citada, é induzido durante o processo de senescência foliar natural em soja. Portanto, a fim de verificar o envolvimento de GmNAC081 no processo de senescência natural foram realizados estudos de genética reversa por meio da técnica de silenciamento gênico induzido por vírus (VIGS). Para isso utilizou-se um vetor para VIGS baseado na modificação do Soybean chlorotic spot virus (SoCSV), um begomovirus que infecta soja e feijoeiro. Os objetivos do trabalho foram clonar a sequência de GmNAC081 no vetor VIGS-SoCSV, inocular soja com a construção obtida, determinar o grau de silenciamento do gene alvo, acompanhar mudanças fenotípicas devido à manipulação da expressão de GmNAC081 e avaliar parâmetros fisiológicos e moleculares de plantas com o gene GmNAC081 silenciado e plantas controle. Deste modo, um fragmento de 404 pb localizado na região carboxi-terminal do gene GmNAC081 foi isolado a partir de cDNA de soja através da técnica de PCR e clonado no vetor para VIGS pSoCSV. Radículas de soja foram inoculadas por biobalística com a construção viral pSoCSV-NAC081 ou apenas com o vetor pSoCSV vazio (controle). A infecção viral foi confirmada via PCR aos 28 dias pós-inoculação. O silenciamento do gene GmNAC081 foi avaliado por análise do decaimento de seus transcritos por PCR em tempo real. As plantas foram avaliadas fenotipicamente durante todo o seu desenvolvimento. Foi determinada também a taxa de peroxidação de lipídeos e, além disso, a expressão de genes que codificam a enzima de processamento vacuolar (VPE) e enzimas hidrolíticas que são alvos diretos de GmNAC081 foi analisada em plantas silenciadas em relação a plantas controle por PCR em tempo real. As plantas que tiveram o gene GmNAC081 silenciado apresentaram senescência foliar atrasada em relação aos controles, mas fora isso exibiram desenvolvimento normal. O atraso da senescência foliar foi associado a uma menor taxa de peroxidação de lipídeos e diminuição da expressão das enzimas hidrolíticas. Além disso, foi observada uma redução na expressão de VPE, um executor da morte celular programada, na planta em que o silenciamento do gene alvo foi mais eficaz. Estes dados em conjunto fornecem um indicativo de que GmNAC081 é um regulador positivo da senescência foliar natural, podendo atuar através do circuito regulatório GmNAC081/VPE. |
| Palavras-chave | GmNAC081, senescência foliar, VIGS |
| Forma de apresentação..... | Painel |