Fome e Abundância: Um Paradoxo Brasileiro?

17 a 22 de outubro de 2016

Trabalho 6109

ISSN 2237-9045
Instituição Universidade Federal de Viçosa
Nível Graduação
Modalidade Pesquisa
Área de conhecimento Ciências Biológicas e da Saúde
Área temática Genética e melhoramento vegetal
Setor Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular
Bolsa CNPq/Balcão
Conclusão de bolsa Não
Apoio financeiro CAPES, CNPq, FAPEMIG
Primeiro autor Thais Carneiro Araujo
Orientador ELIZABETH PACHECO BATISTA FONTES
Outros membros João Paulo Batista Machado
Título Efeito do ácido salicílico no transporte nucleocitoplasmático de NIG (NSP-interacting GTPase) envolvido na infecção por begomovírus
Resumo A proteína NSP (nuclear shuttle protein) de begomovírus facilita o transporte intracelular do DNA viral do núcleo para o citoplasma e atua juntamente com a proteína MP (moviment protein) na propagação do DNA viral para células adjacentes. No entanto, o mecanismo pelo qual NSP medeia o movimento nucleocitoplasmático do DNA viral não é conhecido. Recentemente, a proteína NIG (NSP-interacting GTPase) de Arabidopsis thaliana foi identificada por interagir, in vitro e in vivo, com a proteína NSP de begomovírus. Esta GTPase apresenta propriedades estruturais e bioquímicas que condizem com um possível papel no transporte nucleocitoplasmático do genoma viral, atuando como provável cofator celular para a função da proteína viral NSP. De fato, NSP é redirecionada do núcleo para o citoplasma quando coexpressa transientemente com NIG em células epidérmicas de folha de tabaco. Embora esteja localizada no citosol, NIG apresenta em sua sequência um sinal típico de exportação nuclear. Portanto, com o objetivo de entender o mecanismo pelo qual NIG altera o equilíbrio do transporte de NSP para a exportação nuclear, inicialmente, foi determinada a localização subcelular de NIG-GFP na presença de leptomicina B, um inibidor de exportação nuclear. Ensaios de microscopia confocal mostraram acúmulo de NIG-GFP no núcleo de células de Nicotiana benthamiana expressando transientemente a proteína quimérica. Com o intuito de verificar o estímulo biológico responsável pela alteração no particionamento núcleo-citoplasma de NIG, plantas transgênicas de A. thaliana superexpressando estavelmente NIG-GFP foram inicialmente obtidas e posteriormente submetidas a tratamentos com diferentes fito-hormônios, envolvidos na defesa contra patógenos e no desenvolvimento. As plantas transgênicas foram incubadas com ácido salicílico (SA); metil jasmonato (MeJA); ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D), que mimetiza os hormônios vegetais conhecidos como auxinas; ácido abscísico (ABA) e ácido 1-carboxilíco-1-aminociclopropano (ACC), precursor biossintético do etileno. Os resultados de microscopia confocal mostraram que, entre os fito-hormônios testados, apenas o ácido salicílico foi capaz de direcionar NIG-GFP para o núcleo de células vegetais. SA é um componente chave na resposta de plantas a patógenos e está envolvido no estabelecimento de resistência local e sistêmica. Entretanto, em hospedeiros suscetíveis, vírus de plantas geralmente manipulam os eventos bioquímicos e as interações moleculares necessárias para sua replicação e movimento, resultando na desregulação e ruptura da sinalização hormonal. Diante disto, nossos resultados indicam que o direcionamento nuclear de NIG em resposta ao estímulo com SA pode representar uma estratégia de defesa da planta contra o vírus, sequestrando a proteína NIG no núcleo, o que pode comprometer o transporte da proteína NSP viral para o citoplasma durante a propagação do vírus. Experimentos estão em progresso para o entendimento da função nuclear de NIG.
Palavras-chave Begomovírus, transporte nucleocitoplasmático, ácido salicílico
Forma de apresentação..... Painel
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