Fome e Abundância: Um Paradoxo Brasileiro?

17 a 22 de outubro de 2016

Trabalho 5912

ISSN 2237-9045
Instituição Universidade Federal de Viçosa
Nível Graduação
Modalidade Pesquisa
Área de conhecimento Ciências Biológicas e da Saúde
Área temática Biotecnologia
Setor Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular
Bolsa Outros
Conclusão de bolsa Não
Apoio financeiro CAPES, CNPq, FAPEMIG, Outros
Primeiro autor Renato Lima Senra
Orientador MARIA CRISTINA BARACAT PEREIRA
Outros membros JOSE DOMINGOS GUIMARAES
Título Análise de Dados Proteômicos Do Plasma Seminal De Garanhões Mangalarga Marchador Sob a Influência Da Sazonalidade
Resumo Os equinos são animais poliestrais sazonais, sendo que a atividade reprodutiva é primariamente regulada pelo foto-período. O reflexo dessa sazonalidade sobre os gametas masculinos é demonstrado nas diferenças estruturais e integridade funcional da membrana plasmática dos espermatozoides. As diferenças circanuais afetam a composição e o conteúdo do plasma seminal, e alguns fatores presentes no plasma seminal interagem com a superfície dos espermatozoides, modificando as características de sua membrana, e um desses componentes são as proteínas. As proteínas do plasma seminal têm sido apresentadas como responsáveis por algumas etapas do processo de fertilização, como o estabelecimento das reservas espermáticas no oviduto, a modulação da capacitação e a interação entre gametas. A proteômica do plasma seminal dos garanhões usando eletroforese bidimensional (2-DE), espectrometria de massas e análise dos dados por bioinformática pode auxiliar no entendimento de fatores bioquímicos envolvidos na fertilidade e qualidade do sêmen. O objetivo desse trabalho foi avaliar o proteoma total do sêmen de garanhões em idade reprodutiva e então detectar variações no perfil proteico do plasma seminal entre as estações do ano, visando avaliar as consequências fisiológicas para o processo de reprodução de equinos. Após avaliações físicas do sêmen e retirada das amostras para exames complementares, os espermatozoides foram removidos do plasma seminal por centrifugação, e as amostras de plasma submetidas à separação por 2-DE. A focalização isoelétrica foi em sistema EttanIPGphor 3, em fitas de 24 cm e gradiente de pH entre 3 e 10. A segunda dimensão foi em SDS-PAGE em gel 14,5% T, e os géis foram corados com coomassie blue. Os géis foram digitalizados e analisados utilizando o programa Image Master 2D Platinum 7.0 (GE Healthcare, USA). Os spots de todas as proteínas presentes foram manualmente localizados, excisados, e as proteínas reduzidas, alquiladas e tripsinizadas. As amostras foram então analisadas em espectrômetro de massas MALDI-TOF/TOF (Ultraflex III - Bruker Daltonics), por MS e MS/MS. Como resultado, encontrou-se um conjunto de proteínas com abundância diferencial nas diferentes épocas do ano. As mesmas foram identificadas utilizando os programas MASCOT DAEMON e Peaks Studio 7.5 e as bases de dados UniProt, SwissProt, Equidae. Os dados estão sendo analisados com o auxílio das ferramentas de bioinformática associadas à plataforma ExPASy, String e Cytoscape, e já indicam diferenças significativas na presença de proteínas em estações propícias e não propícias à reprodução. Espera-se, por meio da relação da abundância das proteínas, o entendimento de vias metabólicas e eventos biológicos que sugiram procedimentos para a melhora do processo de reprodução de equinos.
Palavras-chave Proteômica, Plasma Seminal, Bioinformática
Forma de apresentação..... Painel
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