Resumo |
Chlamydomonas reinharditi é uma alga verde unicelular utilizada como organismo modelo e de interesses biotecnológicos, por serem produtoras de proteínas recombinantes e produtos com aplicações farmacêuticas e biocombustíveis.A produção de biomassa por Chlamydomonas é dependente dos meios de cultivo e de alterações no metabolismo energético. Em um meio de cultivo o nitrogênio é um dos nutrientes mais onerosos(sobretudo tendo os sais de amônio como fonte) e ao mesmo tempo essencial para a sobrevivência e o acúmulo de reservas. C. reinhardtii CC125 é uma cepa incapaz de utilizar o nitrato como fonte nitrogenada, utilizando o amônio, aminoácidos e ureia como fontes de nitrogênio. Assim, este trabalho teve por objetivos avaliar o crescimento C. reinhardtii CC125 utilizando ureia como uma fonte alternativa, e de baixo custo, de nitrogênio. Para isso, um experimento foi delineado com cinco tratamentos nos quais o meio de cultivo foi suplementado somente com uréia (100% de ureia, 15,7g/L), somente amônio (100% de NH4Cl, 15g/L) ou ainda com a combinação das duas fontes (25, 50 e 75% de uréia). Para cada tratamento foram feitas 4 réplicas, em frascos de 125 mL, foto períodos de 16:8 h de luz:escuro, agitação de 110 rpm e a intensidade luminosa de 90 μmol de fótons m-2s-1. A densidade celular inicial foi ajustada para 1x105 célmL-1. As determinações do peso seco, biomassa livre de cinzas e proteínas solúveis forambrealizadas após 50 horas de cultivo (fase logarítmica) e 240 horas de cultivo (fase estacionária). Foram observadas diferenças marcantes entre os tratamentos extremos (100% de uréia em comparação com 100% de NH4Cl). Enquanto com 100% NH4 a velocidade de crescimento foi de 0,025 h-1 e o tempo de geração de 12,3 h; no tratamento com 100% U os mesmos parâmetros foram 0,023 h-1 e 12,9 h. Esse resultado sugere que o amônio é utilizado de forma mais eficiente que a ureia. Além disso, os tratamentos com as fontes combinadas apresentaram crescimento diáuxico típico, ou seja,com uma primeira fase logarítmica (consumo da fonte nitrogenada preferencial, NH4), uma fase de adaptação e uma nova fase logarítmica (consumo da fonte alternativa, uréia). Os tratamentos contendo amônio apresentaram uma fase Lag muito rápida(6 horas de cultivo), ao passo que no tratamento com 100% ureia essa fase durou 12 horas. O peso seco e a biomassa livre de cinzas na fase estacionária foram maiores no tratamento com iguais proporções das duas fontes. Adicionalmente, verificou-se que maiores proporções de ureia aumentou o conteúdo proteico na fase estacionária. Assim, os resultados obtidos sugerem que o cloreto de amônio pode ser substituído total ou parcialmente por ureia em cultivos de C. reinhardtii CC125 com incrementos na quantidade de biomassa e proteínas solúveis totais. |