Ciência, saúde e esporte: conhecimento e acessibilidade

21 a 26 de outubro de 2013

Trabalho 532

ISSN 2237-9045
Instituição Universidade Federal de Viçosa
Nível Graduação
Modalidade Pesquisa
Área de conhecimento Ciências Biológicas e da Saúde
Área temática Microbiologia
Setor Departamento de Veterinária
Bolsa PIBIC/CNPq
Conclusão de bolsa Sim
Apoio financeiro CNPq
Primeiro autor Stéfany Dias Teixeira
Orientador MARIA APARECIDA SCATAMBURLO MOREIRA
Outros membros David Germano Gonçalvez Schwarz, Isabel Azevedo Carvalho, Lígia Oliveira Silva, Maria de Lourdes de Abreu Ferrari
Título PCR e RTq-PCR de Mycobacterium avium subespécie paratuberculosis (MAP) a partir de amostras parafinadas de intestino de pacientes acometidos da doença de Crohn, colite ulcerativa, e com outras indicações de colonoscopia
Resumo O Mycobacterium avium subespécie paratuberculosis (MAP) é o agente etiológico da paratuberculose, também conhecida por doença de Johne, enfermidade que tem causado grandes prejuízos econômicos em virtude da perda de carne e leite decorrente de uma intensa e profusa diarreia em ruminantes, além de ser um provável agente zoonótico. Desde o primeiro isolamento do MAP em tecido intestinal de pacientes humanos acometidos com a Doença de Crohn (DC), a possibilidade de uma etiologia infecciosa tem sido amplamente discutida e estudada. Esta bactéria tem atraído o interesse de vários pesquisadores devido às similaridades entre DC e a Paratuberculose. Porém, estudos têm produzido resultados controversos quanto à presença de MAP em tecidos de pacientes com a DC, o que despertou ainda mais o nosso interesse pelo estudo em questão. O objetivo desse estudo foi verificar a presença de MAP em tecidos embebidos em parafina fixados em formalina de biópsias intestinais humanas de pacientes atendidos no Instituto Alfa de Gastroenterologia de Minas Gerais, Brasil, divididos em três grupos: acometidos pela doença de Crohn (DC), com colite ulcerativa (CU) e sem inflamação no intestino (nIBD), no caso, controles. A presença desse agente foi demonstrada pela realização de técnicas moleculares, IS900 PCR convencional e PCR em tempo real (RTq-PCR), para detectação da carga bacteriana. O DNA foi extraído com sucesso de todas as amostras parafinadas e das 174 amostras, apenas cinco apresentaram fragmentos de tamanho semelhante ao esperado, onde 1/44 (2,3%) DC, 2/49 (4%) CU e 2/56 (3,5 %) nIBD. Nestas amostras, observaram-se valores de 192,12 cópias/l no grupo DC, 72,28 cópias/l no CU e 81,43 cópias/l no grupo nIBD. Observou-se que o grupo DC teve maior carga bacteriana nas amostras estudadas, embora não foi possível fazer inferências estatísticas, devido ao pequeno número de amostras positivas. Conclui-se que o MAP foi detectado em todos os grupos de paciente analisados, embora a maior carga bacteriana tenha sido observada no grupo referente à Doença de Crohn, sendo este o primeiro relato da presença de MAP em amostras parafinadas de intestino humano no Brasil.
Palavras-chave RTq-PCR, amostras parafinadas, MAP
Forma de apresentação..... Oral
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