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21 a 26 de outubro de 2013

Trabalho 198

ISSN 2237-9045
Instituição Universidade Federal de Viçosa
Nível Graduação
Modalidade Pesquisa
Área de conhecimento Ciências Agrárias
Área temática Microbiologia
Setor Departamento de Microbiologia
Bolsa PIBIC/CNPq
Conclusão de bolsa Sim
Apoio financeiro CAPES, CNPq, FAPEMIG
Primeiro autor Ralf Bruno Moura Lopes
Orientador MARISA VIEIRA DE QUEIROZ
Outros membros ELZA FERNANDES DE ARAUJO
Título Antagonismo microbiano, variabilidade genética e análise dos perfis de macro-restrição por eletroforese em campo pulsado (PFGE) de actinobactérias endofíticas do feijoeiro comum (Phaseolus vulgaris)
Resumo Bactérias endofíticas, especialmente as actinobactérias, podem representar uma fonte promissora de compostos bioativos para o controle de fitopatógenos. No entanto, há poucas informações na literatura sobre as actinobactérias endofíticas do feijoeiro comum (Phaseolus vulgaris) e as suas características genéticas. Dessa forma, os objetivos deste trabalho consistiram em: (i) avaliar a atividade antimicrobiana de extratos de culturas de actinobactérias endofíticas das folhas do feijoeiro comum contra bactérias fitopatogênicas (Xanthomonas axonopodis pv. phaseoli e Curtobacterium flaccumfaciens pv. flaccumfaciens) dessa leguminosa, (ii) analisar a variabilidade genética dos isolados endofíticos por meio dos marcadores moleculares BOX-PCR e ERIC-PCR, e (iii) avaliar o perfil genômico de Microbacterium testaceum, a espécie predominante entre as actinobactérias deste estudo, por eletroforese em campo pulsado (PFGE). Foram analisados quarenta isolados obtidos das cultivares Talismã, Ouro Negro e Vermelhinho. Os extratos das culturas com maior atividade antimicrobiana foram submetidos a tratamentos com enzimas (pronase E, proteinase K, tripsina, DNase I e RNase), solventes orgânicos (metanol, etanol, acetona e tolueno), diferentes temperaturas (42, 65, 100 e 121°C) e diferentes valores de pH (3,0-9,5). Os perfis de bandas obtidos para os marcadores moleculares foram avaliados utilizando o software Bionumerics® (versão 6.0) e a matriz de similaridade foi construída a partir do coeficiente de Jaccard, sendo o agrupamento realizado com o algoritmo UPGMA. Para comparar os perfis de macro-restrição obtidos por PFGE, foi utilizado o coeficiente de similaridade de Dice com o mesmo algoritmo e o mesmo software. Os resultados mostraram que M. testaceum foi a maior produtora de antimicrobianos e indicaram a natureza proteica termoestável da substância antimicrobiana. Além disso, foi encontrada uma ampla variabilidade nos isolados, que foram agrupados em 15 e 18 unidades taxonômicas operacionais (OTUs), respectivamente, para o BOX-PCR e o ERIC-PCR, podendo ser discernidas determinadas OTUs de acordo com a cultivar de origem dos isolados. Perfis genômicos específicos para diferentes isolados de M. testaceum foram obtidos por PFGE com fragmentos de DNA produzidos por tratamento com a enzima XbaI. Esses perfis permitiram identificar 13 grupos dessa espécie no feijoeiro e mostraram que os isolados provenientes das cultivares Vermelhinho e Ouro Negro foram mais similares entre si. O estudo de actinobactérias endofíticas pode fornecer possibilidades para o desenvolvimento de produtos para o controle de patógenos do feijoeiro e a determinação da extensão da variabilidade existente entre elas torna-se importante para estudos genéticos futuros, incluindo prospecção de genes e melhoramento genético, que poderão auxiliar na exploração das suas potencialidades.
Palavras-chave Antimicrobianos, PCR, PFGE
Forma de apresentação..... Oral
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