Resumo |
É crescente o uso de técnicas biotecnológicas em pesquisas com plantas e, no segmento de clonagem de vegetais, a micropropagação comparada a outras técnicas, tem sido considerada aquela que mais se difundiu nos últimos anos, com aplicações evidenciadas em várias espécies. Apesar de ser considerado vantajoso o uso da micropropagação, há em contrapartida fatores que limitam o sua produção em larga escala como, por exemplo, a autoclavagem utilizada em laboratórios de cultura de tecido como forma de esterilização de meios de cultura, diante dos atuais custo do equipamento e elevado consumo de energia. Alternativa para substituição da autoclavagem é a possibilidade de conseguir a esterilização de meios nutritivos pela adição de hipoclorito de sódio (NaClO), porém tal feito pode resultar em pequena redução no número de brotações. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar a viabilidade da substituição da técnica de esterilização por autoclavagem pela técnica de esterilização química com (NaClO) em meios de cultura e seu efeito em diferentes concentrações sobre o desenvolvimento de clones híbridos de Eucalyptus globulus. O teste realizado teve como intuito avaliar o efeito de três concentrações de cloro ativo adicionado ao meio de cultura, sobre a eliminação de microrganismos. Os tratamentos observados foram: 1) meio de cultura basal preparado, mas sem autoclavagem (tratamento controle a); 2) meio de cultura, mas sem adição de NaClO ao meio de cultura (tratamento controle b) e sem autoclavagem; 3) meio de cultura, adicionado de 0,0001% de cloro ativo total; 4) meio de cultura adicionado de 0,001% de cloro ativo total; 5) meio de cultura, adicionado de 0,01% de cloro ativo total. Não foram autoclavados os meios de cultura nos quais foram adicionados (NaClO). Aos 23 dias após da inoculação avaliou-se em cada tratamento a percentagem de contaminação (fungo/bactéria), massa seca e massa fresca e o número e tamanho das brotações. Pode-se observar que o tratamento 1 obteve 0% de contaminação. No entanto observou-se contaminação em 100% dos tratamentos 2 e 3. Para o tratamento 4 foi observado 95% de contaminação e o tratamento 5 obteve percentagem de descontaminação. As percentagens de contaminações por bactérias foram elevadas em menores concentrações de hipoclorito de sódio no meio de cultura e decresceram gradualmente à medida que estas concentrações aumentaram. Para fungos não se conseguiu para nenhum dos tratamentos 100% descontaminação. Os tratamentos com hipoclorito mensurados apresentaram maiores médias para todas as características avaliadas. Os tratamentos com maiores concentrações de hipoclorito apresentaram maiores percentagens de descontaminação. A contaminação por bactérias foi maior nas menores concentrações de hipoclorito no meio de cultura sendo eliminadas a 0,01% de NaClO. Não houve diferenciação visual de vigor entre os tratamentos com hipoclorito e o tratamento–controle. |