| Resumo |
O Brasil tem um rebanho de equinos que ultrapassa 5,7 milhões de cabeças. Por isso, existe crescente fomento à aplicação de biotecnologias reprodutivas. Dentre elas, a técnica mais difundida é a inseminação artificial. Todavia, a exposição do sêmen de garanhão a baixas temperaturas acarreta danos celulares e estimula a produção de espécies reativas de oxigênio, o que pode favorecer a redução da motilidade, da fluidez da membrana plasmática e, consequentemente, a queda da fertilidade. Como forma de tentar diminuir os impactos negativos da criopreservação espermática tem sido proposto a adição de moléculas antioxidantes aos meios diluidores. Diante disso, os objetivos deste trabalho foram avaliar a integridade física, funcionalidade da membrana plasmática e cinética espermática de espermatozoides submetidos à criopreservação com diferentes concentrações de curcumina, previamente dissolvida em DMSO. Para tanto, foram utilizados três ejaculados de cinco garanhões da raça Mangalarga Marchador, que foram criopreservados em meio base Botu-Crio®, na concentração de 200 x 106 de espermatozoides/mL, em diferentes tratamentos: grupo CURC10 meio base adicionado de 10 µM de curcumina; CURC50, meio base adicionado de 50 µM de curcumina; CONT+, em meio base adicionado de DMSO; e CONT-, meio base sem adição de quaisquer substâncias. As amostras foram descongeladas em banho-maria a 37,5 oC por 30 segundos para realização dos testes hisposmótico, supravital e avaliação da cinética espermática computadorizada. O teste hiposmótico foi realizado mediante incubação das amostras em água destilada. Foram analisadas 200 células, considerando aquelas com caudas enroladas como com membranas não funcionais. O teste supravital foi realizado para medir a integridade da membrana plasmática, mediante uso de Eosina-Nigrosina. Das 200 células avaliadas, foram consideradas vivas aquelas não coradas. A cinética espermática foi avaliada mediante uso do software Mace®, para motilidade total e motilidade progressiva. Embora os testes relacionados à integridade e funcionalidade de membrana não tenham apresentado diferença significativa entre os grupos estudados, a motilidade progressiva do grupo CONT- foi superior (20,8 ± 1,0) ao grupo CONT+ (15,0 ± 1,2), sendo que os grupos CURC10 e CURC50 não apresentaram diferença entre si (18,6 ± 1,6 e 19,1 ± 1,0, respectivamente). Diante do exposto, concluiu-se que a adição de curcumina no meio de criopreservação, nas concentrações estudadas, não apresentou efeitos benéficos nos parâmetros testados. Novos estudos devem ser realizados, com diferentes concentrações de curcumina, outros solventes e maior n experimental. |