Das Montanhas de Minas ao Oceano: Os Caminhos da Ciência para um Futuro Sustentável
20 a 25 de outubro de 2025
Trabalho 22440
| ISSN | 2237-9045 |
|---|---|
| Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
| Nível | Graduação |
| Modalidade | Pesquisa |
| Área de conhecimento | Ciências Biológicas e da Saúde |
| Área temática | Dimensões Ambientais: ODS14 |
| Setor | Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular |
| Bolsa | Outros |
| Conclusão de bolsa | Sim |
| Apoio financeiro | CAPES, CNPq, FAPEMIG, Outros, SICOOB-UFVCredi |
| Primeiro autor | Laura Alves Zuanon |
| Orientador | TIAGO ANTONIO DE OLIVEIRA MENDES |
| Outros membros | Camila Aparecida Martins, JENER ALEXANDRE SAMPAIO ZUANON, Jojo Rodrigues, Karina Ventura Boechat Martins |
| Título | Potencial de novo antígeno recombinante desenhado por imunoinformática para proteção de peixe zebrafish contra infecção por Aeromonas hydrophila e Pseudomonas fluorescens |
| Resumo | A aquicultura, sistema de produção baseado no cultivo de peixes, moluscos, algas e outros indivíduos aquáticos para a alimentação humana, está em crescimento e contribui significativamente na economia mundial, movimentando cerca de US$232 bilhões por ano. A produção de peixes sofre perdas anuais correspondentes a bilhões de dólares devido à mortalidade dos animais causada por doenças infecciosas. Estes agentes patológicos podem ser bactérias, vírus, fungos, protozoários e parasitas, que, além de acometerem os animais, podem causar prejuízos aos produtores e à saúde humana quando consumidos. Dentre os gêneros de bactérias patogênicas mais frequentes neste cenário, destacam-se Aeromonas e Pseudomonas. A espécie Aeromonas hydrophila pode causar síndrome ulcerativa epizoótica em peixes e gastroenterites em humanos quando ingerida através de alimentos contaminados, enquanto a Pseudomonas fluorescens pode causar septicemia hemorrágica nos peixes e pneumonia em seres humanos. Assim, se faz necessário utilizar métodos preventivos contra estas doenças, como vacinas, cuja aplicação traz baixos impactos ao meio ambiente quando comparada com o uso de antibióticos, tradicional neste sistema. Em grandes produções, a escolha por vacinas de via oral é preferível às injetáveis, devido à sua maior abrangência de aplicação e menor custo laboral. O objetivo desta pesquisa foi construir e produzir antígeno recombinante e avaliar seu potencial de imunização contra estas doenças infecciosas. Foram utilizadas ferramentas de bioinformática para acessar sequências potencialmente imunogênicas de proteínas de cada patógeno e estas foram submetidas ao BepiPred 2.0 para predição de epítopos capazes de estimular células B (resposta humoral) e TCD4 (resposta celular). Foi realizada a construção do gene contendo a sequência recombinante, sua clonagem em plasmídeo pET28a e a transformação de bactérias Escherichia coli BL21 e ArcticExpress através de choque térmico. Foram selecionadas colônias positivas e induzida a expressão da proteína recombinante. A produção foi confirmada através de SDS-PAGE e Western Blotting e a purificação realizada por cromatografia de afinidade utilizando coluna de níquel, seguida pela quantificação por Bradford. Os peixes (Danio rerio) foram alocados em aquários de 30L e injetados intraperitonealmente com diferentes formulações contendo a proteína quimérica, administrada em duas doses. Após 10 dias, os peixes foram inoculados intraperitonealmente com solução contendo A. hydrophila e a mortalidade observada por 10 dias. Os ensaios realizados indicam que a expressão e purificação da proteína foram bem sucedidas e o desafio bacteriano apresentou alta taxa de sobrevivência, sugerindo que o antígeno produzido é um bom candidato a vacina contra esse patógeno. Há de serem realizados testes de sobrevivência frente a infecção por P. fluorescens e preparo da formulação oral da vacina, bem como a avaliação do seu efeito imunizante. |
| Palavras-chave | Danio rerio, vacina oral, infecção bacteriana |
| Forma de apresentação..... | Painel |
| Link para apresentação | Painel |
|---|