Das Montanhas de Minas ao Oceano: Os Caminhos da Ciência para um Futuro Sustentável
20 a 25 de outubro de 2025
Trabalho 22419
| ISSN | 2237-9045 |
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| Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
| Nível | Graduação |
| Modalidade | Pesquisa |
| Área de conhecimento | Ciências Biológicas e da Saúde |
| Área temática | Dimensões Sociais: ODS2 |
| Setor | Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular |
| Bolsa | PIBIC/CNPq |
| Conclusão de bolsa | Sim |
| Apoio financeiro | CNPq |
| Primeiro autor | Murillo Emery de Carvalho Neto |
| Orientador | TIAGO ANTONIO DE OLIVEIRA MENDES |
| Outros membros | Isabela Malaquias Dalto de Souza |
| Título | Avaliação da estabilidade de dsRNA em diferentes condições de cultivo e armazenamento |
| Resumo | O RNA de fita dupla (dsRNA) apresenta grande potencial como tecnologia alternativa a ser utilizada em diversas áreas do conhecimento, inclusive para a produção de insumos agrícolas, sendo usado para o controle de pragas (bioinseticidas) e doenças em plantas, além de poder auxiliar no desenvolvimento de plantas com características agronômicas desejáveis ou, ainda, serem usados como promotores de crescimento. Entretanto, a manutenção de sua estabilidade durante o armazenamento é um desafio para sua aplicação, sendo necessário estudos que avaliem qual temperatura é ideal para que sua eficácia seja mantida durante um maior período de tempo. Neste estudo, avaliou-se a estabilidade do dsRNA produzido em Escherichia coli HT115, cultivada nos meios LB e TB (meio seletivo Luria Bertani Agar (LB-ágar) e meio seletivo Terrific Broth Agar (TB-ágar), respectivamente), submetida à indução com diferentes concentrações de IPTG (0,5 mM; 0,75 mM; 1 mM) em temperaturas de 30 °C e 37 °C. As amostras foram extraídas, quantificadas e armazenadas em três diferentes temperaturas: 4 °C, –20 °C e –80 °C, sendo analisadas por eletroforese em gel de agarose após 15, 30 e 45 dias; nesse mesmo intervalo de tempo foi realizada a quantificação das amostras pelo NanoDropTM 2000. Passados os 45 dias e após realizadas as avaliações qualitativas e quantitativas, observou-se que o dsRNA produzido a 37 °C apresentou maior estabilidade independentemente da temperatura de armazenamento, permanecendo íntegro por até 45 dias. Concentrações mais baixas de IPTG (0,5 mM) resultaram em degradação mais rápida do dsRNA. Além disso, o meio LB demonstrou melhor desempenho para manutenção da estabilidade em comparação ao meio TB. Por outro lado, o dsRNA produzido a 30 °C apresentou baixa atividade logo após a extração, com degradação acentuada em todos os tratamentos. Esses resultados fornecem subsídios importantes para a otimização das condições de produção, formulação e armazenamento de dsRNA voltado a aplicações biotecnológicas. |
| Palavras-chave | dsRNA, estabilidade, armazenamento |
| Forma de apresentação..... | Painel |
| Link para apresentação | Painel |
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