Das Montanhas de Minas ao Oceano: Os Caminhos da Ciência para um Futuro Sustentável
20 a 25 de outubro de 2025
Trabalho 22310
| ISSN | 2237-9045 |
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| Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
| Nível | Graduação |
| Modalidade | Pesquisa |
| Área de conhecimento | Ciências Biológicas e da Saúde |
| Área temática | Dimensões Sociais: ODS3 |
| Setor | Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular |
| Bolsa | FAPEMIG |
| Conclusão de bolsa | Não |
| Apoio financeiro | CAPES, CNPq, FAPEMIG |
| Primeiro autor | Lucas Cotrim dos Santos |
| Orientador | JULIANA LOPES RANGEL FIETTO |
| Outros membros | Julia Mayrink Ferreira Alves, Letícia Alves Lopes |
| Título | Expressão escalonada e randomização de scFvs em E. coli: Base para desenvolvimento de bibliotecas de scFvs funcionais |
| Resumo | Imunoterapia é um tipo de prática que visa condicionar o sistema imunológico de cada pessoa a responder de maneira mais eficaz contra determinados ataques contra a saúde, e tem se destacado como abordagem inovadora no tratamento de doenças inflamatórias, autoimunes e cânceres. Apesar da eficácia dos anticorpos monoclonais (mAbs), sua produção enfrenta desafios relacionados ao alto custo e à complexidade estrutural. Fragmentos de anticorpos de cadeia única (scFv) surgem como alternativa promissora, pois representam apenas os domínios variáveis das cadeias pesada e leve ligados por um peptídeo. Esse domínio contém a sequência responsável pela ligação ao antígeno, mantendo a especificidade por seus alvos, tendo um tamanho menor e sendo mais facilmente produzido em sistemas bacterianos. Neste projeto, buscamos expressar heterologamente um scFv modelo em E. coli, padronizando sua produção e utilizando-o como referência para o desenvolvimento de uma biblioteca randômica. A partir desse modelo, realizamos estudos in silico com foco na delimitação de regiões críticas para mutagênese, e in vitro, construímos um novo vetor de expressão otimizado, visando a viabilização e produção em biorreator. Como resultados parciais, destacamos a construção e validação de um plasmídeo adaptado para expressão em larga escala, por meio da técnica de Gibson Assembly, além do desenvolvimento de uma variante do scFv com regiões-alvo estrategicamente definidas para aplicação em estratégias de randomização. Para isso, empregamos a metodologia Golden Gate com o objetivo de introduzir mutações aleatórias em regiões específicas do scFv, promovendo diversidade controlada para futuras análises funcionais. Essa abordagem integrada entre bioinformática, biologia molecular e expressão heteróloga propõe uma plataforma inovadora para a triagem e seleção de scFvs, com potencial aplicação em terapias direcionadas, imunodiagnóstico e no desenvolvimento de novos imunobiológicos. Os resultados parciais permitem vislumbrar tanto o escalonamento do método quanto a seleção de scFvs para doenças e biofármacos, utilizando a estratégia de randomização. Ademais, ressaltamos nossos agradecimentos aos apoiadores e colaboradores do projeto, FAPEMIG, CNPq, CAPES, DBB e Bioagro, responsáveis pelo suporte financeiro e de infraestrutura, os quais foram alicerces indispensáveis dessa iniciativa científica. |
| Palavras-chave | scFv, expressão heteróloga, anticorpos |
| Forma de apresentação..... | Painel |
| Link para apresentação | Painel |
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