Das Montanhas de Minas ao Oceano: Os Caminhos da Ciência para um Futuro Sustentável
20 a 25 de outubro de 2025
Trabalho 22149
| ISSN | 2237-9045 |
|---|---|
| Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
| Nível | Graduação |
| Modalidade | Pesquisa |
| Área de conhecimento | Ciências Biológicas e da Saúde |
| Área temática | Dimensões Sociais: ODS2 |
| Setor | Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular |
| Bolsa | Outros |
| Conclusão de bolsa | Sim |
| Apoio financeiro | Outros |
| Primeiro autor | Maria Eduarda Pizzatto Nogueira |
| Orientador | TIAGO ANTONIO DE OLIVEIRA MENDES |
| Outros membros | Ananda Pereira Aguilar |
| Título | Formulação de dsRNA para controle de Spodoptera frugiperda baseado na tecnologia de RNA de interferência |
| Resumo | A soja e o milho são as principais commodities brasileiras, com mais de 30 milhões (soja) e 15 milhões (milho) de hectares plantados no país. A Spodoptera frugiperda, também conhecida como lagarta-do-cartucho , é uma praga que acomete essas plantações, sendo capaz de causar enormes prejuízos econômicos. O uso de inseticidas convencionais e de cultivares resistentes é amplamente empregado, porém os prejuízos ao meio ambiente, além de fatores de adaptação evolutiva dos insetos, incentivam a busca por tecnologias eficientes para o controle dessa praga, como a utilização do silenciamento gênico induzido por RNA de dupla fita. O objetivo deste trabalho foi produzir uma formulação de dsRNA eficiente contra S. frugiperda a partir de clonagem de genes alvo em bactérias e nanoencapsulamento por meio de formulação de biopolímeros, seguindo protocolos de baixo custo e com potencial de aplicabilidade em grandes indústrias. A metodologia utilizada consiste na amplificação do gene alvo, a partir do cDNA de lagartas, seguido por clonagem em um plasmídeo pGEM®-T Easy. Então, foi feita a transformação na linhagem E. coli DH5α, que multiplicou o plasmídeo, seguido de extração de DNA plasmidial contendo o inserto e transformação na linhagem E. coli HT155, que é produtora de dsRNA. Após inoculação e indução da HT115, as moléculas de interesse foram extraídas utilizando um protocolo de baixo custo, com cloreto de sódio e etanol. As moléculas de dsRNA obtidas foram utilizadas para o preparo da formulação de nanoencapsulamento, visando obter melhora na estabilidade e entrega do produto. A formulação foi utilizada em ensaio biológico com 4 grupos experimentais de 64 indivíduos cada, sendo dois grupos controles, um onde houve aplicação de água e outro a nanocápsula sem dsRNA e dois grupos experimentais com dois diferentes dsRNAs nanoencapsulados. As lagartas foram colocadas em células individuais e alimentadas com dieta contendo as respectivas aplicações, a mortalidade foi avaliada durante 7 dias e ao final do experimento foram escolhidas aleatóriamente 10 lagartas sobreviventes de cada grupo para medição de tamanho relativo. A amplificação, a clonagem e as transformações foram confirmadas por meio de PCR e eletroforese em gel de agarose. A integridade do dsRNA foi visualizada em gel de agarose também. Os resultados do teste biológico mostram mudanças significativas no tamanho, com uma diferença média considerável entre os insetos tratados e os não tratados, visto que o gene alvo de silenciamento é de extrema importância para o crescimento e desenvolvimento das lagartas. Outros testes serão realizados para avaliar a eficiência do dsRNA contra a lagarta-do-cartucho, como a comparação da expressão dos genes alvo nos grupos experimentais por meio de RT-qPCR. |
| Palavras-chave | dsRNA, formulação, Spodoptera frugiperda |
| Forma de apresentação..... | Painel |
| Link para apresentação | Painel |
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