Das Montanhas de Minas ao Oceano: Os Caminhos da Ciência para um Futuro Sustentável
20 a 25 de outubro de 2025
Trabalho 22091
| ISSN | 2237-9045 |
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| Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
| Nível | Graduação |
| Modalidade | Pesquisa |
| Área de conhecimento | Ciências Biológicas e da Saúde |
| Área temática | Dimensões Econômicas: ODS9 |
| Setor | Departamento de Biologia Vegetal |
| Bolsa | CNPq |
| Conclusão de bolsa | Não |
| Apoio financeiro | CAPES, CNPq, FAPEMIG |
| Primeiro autor | Karolina Carvalho Nascimento |
| Orientador | WAGNER CAMPOS OTONI |
| Outros membros | Andréa Dias Koehler, Claudinei da Silva Souza, Kleiton Lima de Godoy Machado, Louise Alves Salvato |
| Título | Avaliação da expressão do gene Mildew Locus O (BoMLO) em linhagens de urucum (Bixa orellana L.) com superexpressão e silenciamento do microRNA156//// |
| Resumo | O urucum (Bixa orellana L., Bixaceae, Malvales) é uma planta de porte arbustivo e lenhoso nativa da Amazônia, reconhecida como a principal fonte natural de bixina, um corante carotenoide amplamente utilizado nas indústrias alimentícia, cosmética e têxtil. Além de seu valor econômico, a espécie tem sido empregada como planta-modelo em estudos de respostas a estresses bióticos e abióticos, devido às suas características fisiológicas específicas. Entretanto, B. orellana é altamente suscetível ao oídio (Oidium bixae, Erysiphales), um fungo biotrófico com ampla distribuição geográfica e capaz de infectar diversas espécies de interesse agrícola, especialmente sob condições ambientais quentes e secas. Estudos indicam que a suscetibilidade ao patógeno pode estar relacionada à expressão do gene Mildew Locus O (MLO), envolvido na interação planta-patógeno. A inativação desse gene tem sido associada à resistência ao oídio, embora possa comprometer o desenvolvimento e a produtividade de plantas modificadas geneticamente. Diante disso, o presente trabalho teve como objetivo avaliar a modulação do gene MLO influenciada pelo hub microRNA156-SPL. Para a detecção de transgenes, foram coletadas folhas expandidas de três linhagens distintas de B. orellana: BoNT (plantas controle), BoSTTM (silenciadas para miR156) e BoOE::156 (superexpressoras do miR156), todas cultivadas em casa de vegetação, sob as normas de biossegurança da CIBio/UFV e CTNBio. Para a confirmação dos eventos transformados foi realizado os testes histoquímico e de PCR para o gene da β-glucuronidase (GUS). Para o teste relacionado ao gene MLO, foi realizada a extração de RNA total com cloreto de lítio. A quantificação foi feita com o equipamento NanoDrop ND-1000, e a integridade do material verificada por eletroforese em gel de agarose 1,5% livre de RNAses. O RNA foi tratado com DNAse e a síntese de cDNA foi realizada a partir de 1 µg de RNA, utilizando 0,5 µg de oligo-dT, 10 mM de dNTPs e 200 U de transcriptase reversa MMLV (RNAse H-). A expressão do gene BoMLO3 foi avaliada por PCR semi quantitativo. Para a normalização da expressão gênica, foi empregado o gene de referência RPL38 (proteína ribossômica L38 60S). As linhagens BoOE::miR156 apresentaram coloração indigo-blue típica do teste histoquímico de GUS nos órgãos avaliados, diferentemente das linhagens BoSTTM. Adicionalmente, houve a amplificação do gene repórter GUS por PCR nas linhagens transgênicas. Para o gene MLO3 as linhagens BoOE::miR156 apresentaram maior expressão, em comparação com BoNT e BoSTTM, o que podem sugerir maior suscetibilidade ao oídio. |
| Palavras-chave | Bixa orellana, Mildew Locus O, análises moleculares |
| Forma de apresentação..... | Painel |
| Link para apresentação | Painel |
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