Das Montanhas de Minas ao Oceano: Os Caminhos da Ciência para um Futuro Sustentável
20 a 25 de outubro de 2025
Trabalho 21974
| ISSN | 2237-9045 |
|---|---|
| Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
| Nível | Graduação |
| Modalidade | Pesquisa |
| Área de conhecimento | Ciências Biológicas e da Saúde |
| Área temática | Dimensões Sociais: ODS2 |
| Setor | Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular |
| Bolsa | CNPq |
| Conclusão de bolsa | Sim |
| Apoio financeiro | CNPq |
| Primeiro autor | Mariana Grôppo Parma |
| Orientador | TIAGO ANTONIO DE OLIVEIRA MENDES |
| Outros membros | Isabela Malaquias Dalto de Souza |
| Título | Análise de expressão dos genes da família SPL em Urochloa e uso como alvo para promoção de aumento de biomassa vegetal por RNA de interferência |
| Resumo | INTRODUÇÃO: As plantas do gênero Urochloa têm importância na pecuária nacional por elevada produtividade, recuperação de áreas degradadas e alternativa nutritiva e economicamente viável para a alimentação bovina. A busca por produzir mais, mas sem ampliação das áreas destaca a família SPL (SQUAMOSA-Promoter Binding Protein), que é descrita em várias plantas pelos papéis no desenvolvimento vegetal, duração da fase vegetativa e mudança para a reprodutiva e formação de novas folhas e pela regulação por miRNA, de forma que são genes candidatos a silenciamento por RNA de interferência para promover aumento de biomassa vegetal de forma escalável e econômica. OBJETIVOS: Identificar e selecionar genes da família SPL em Urochloa brizantha; avaliar o padrão de expressão destes ao longo do desenvolvimento em diferentes tecidos e condições de fotoperíodo; produzir dsRNA in vivo para os genes SPL selecionados e testar a aplicação do dsRNA em Urochloa brizantha, analisando seu impacto na expressão gênica e na produção de biomassa vegetal. MATERIAL E MÉTODOS: A comparação filogenética foi utilizada para obter sequências candidatas aos genes SPL em Urochloa. Para avaliar a expressão destes ao longo do desenvolvimento, foram realizadas 12 coletas de folhas e caules, seguidas de processamento para PCR em tempo real. A produção do dsRNA in vivo se deu pela clonagem do gene SPL no vetor pGEM-T Easy e transformação da Escherichia coli DH5⍺ com esse vetor, realizou-se o Sequenciamento de Sanger para validar a construção e o plasmídeo dessa bactéria com o alvo de interesse foi utilizado na transformação da E. coli HT115. Em seguida, fez-se o crescimento da bactéria transformada para extração de dsRNA baseado em lise salina e precipitação em álcool para aplicação deste em Urochloa, com coleta de amostras para PCR em tempo real e determinação de massa seca. RESULTADOS: As sequências de SPL obtidas por alinhamento foram validadas em Urochloa e por isso foram utilizadas para análise de expressão destes por PCR em tempo real, uma vez que as amostras foram processadas com sucesso. Obteve-se padrões de expressão coerentes com a literatura de outras plantas indicando um potencial alvo de silenciamento para aumento na produção de biomassa. A clonagem do gene alvo em E. coli e a expressão do dsRNA por essa bactéria foram validados com êxito e então a aplicação do dsRNA produzido foi avaliada em casa de vegetação. Os dados de PCR em tempo real forneceram uma pequena redução na expressão dos genes SPL com aplicação do dsRNA e a massa seca revelou aumento na produtividade com a aplicação, de forma que o aumento de biomassa vegetal foi observado. CONCLUSÕES: As análises realizadas demonstraram a presença dos genes candidatos a SPL em Urochloa e o experimento de aplicação do dsRNA permitiu análise visual e de matéria seca que conferem indícios da aplicação biotecnológica desses genes como candidatos para aumento da biomassa. |
| Palavras-chave | RNA de interferência, Urochloa, produtividade |
| Forma de apresentação..... | Vídeo |
| Link para apresentação | Vídeo |
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