| Resumo |
Meloidogyne javanica é um nematoide fitoparasita de ampla ocorrência, responsável por perdas agrícolas globais que ultrapassam 35 bilhões de reais anuais. Como alternativa ao controle químico, o gênero Streptomyces tem se destacado por sua versatilidade metabólica, sendo reconhecido pela produção de antibióticos, compostos bioativos e enzimas. Dentre as enzimas, as quitinases podem degradar a matriz quitinosa dos ovos de nematoides, o que é uma estratégia promissora e ambientalmente amigável. O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade de Streptomyces sp. UFV CAB-C 21 sobre ovos de M. javanica a partir da indução da expressão de quitinases. O experimento foi realizado no Laboratório de Genética Molecular de Bactérias – LGMB/BIOAGRO-UFV. Para as análises realizadas a bactéria Streptomyces sp. UFV CAB-C 21 foi ativada por 7 dias a 28 °C em meio International Streptomyces Project (ISP-2). A quitina coloidal (1 % p/v) foi utilizada como indutor em meio mineral (g.L-1): K2HPO4 0,7, KH2PO4 0,3, MgSO4 0,5, FeSO4 0,01, ZnSO4 0,001, MnSO4 0,001, (NH4)2SO4 0,25, pH 6,3 e discos da bactéria foram inoculados, a cultura foi incubada a 28 °C sob agitação de 150 rpm. O crescimento bacteriano foi monitorado por determinação da população de viáveis (UFC/mL) enquanto a atividade de quitinases foi avaliada a partir dos sobrenadantes pelo método de DNS. A atividade nematicida foi investigada in vitro contra ovos de M. javanica, expostos ao sobrenadante induzido por quitina, usando como controle meio mínimo acrescido de quitina coloidal. As avaliações foram realizadas em placas de 24 poços, com contagens diárias de ovos em microscópio óptico invertido, e os dados analisados por ANOVA e teste de Tukey no software R. O isolado Streptomyces sp. UFV CAB-C 21 apresentou pico de produção de quitinase no 6º dia (366 U/mL), indicando correlação com a transição da fase exponencial para a estacionária. O pH do meio permaneceu estável 8,5 após leve acidificação inicial. A análise protéica por SDS-PAGE indicou aumento da expressão enzimática entre o 4º e 6º dia, compatível com a fase exponencial e o aumento na produção de quitinases. A expressão manteve-se estável até o 14º dia, acompanhando a quantificação proteica total. Os sobrenadantes coletados no 4º, 5º e 13º dia de cultivo promoveram significativa eclosão prematura de ovos de M. javanica, resultando em 80 % de eclosão após 7 dias, independentemente do tempo de incubação. Os resultados indicam o potencial de Streptomyces sp. CAB-C 21 como agente para biocontrole de M. javanica, reforçando seu uso em estratégias no manejo de fitonematoides. Financiamento:MAI/DAI CNPq; Sítio Barreiras Fruticultura Ltda; FAPEMIG; CAPES. |