| ISSN |
2237-9045 |
| Instituição |
Universidade Federal de Viçosa |
| Nível |
Graduação |
| Modalidade |
Pesquisa |
| Área de conhecimento |
Ciências Biológicas e da Saúde |
| Área temática |
Dimensões Ambientais: ODS7 |
| Setor |
Departamento de Microbiologia |
| Bolsa |
Não se Aplica |
| Conclusão de bolsa |
Não |
| Apoio financeiro |
CAPES |
| Primeiro autor |
Maria Paula Soares de Figueiredo |
| Orientador |
MATEUS FERREIRA SANTANA |
| Outros membros |
Blenda de Freitas Rodrigues Jesuino, Luciano Nascimento de Almeida, Rodrigo da Silva Duarte, Sumaya Martins Tupy |
| Título |
Prospecção gênica e expressão heteróloga do gene codificante de xilanase de bactérias de crescimento lento para aplicações biotecnológicas |
| Resumo |
Os microrganismos que são cultivados em condições laboratoriais representam apenas 1% da diversidade microbiana, fenômeno que é denominado como “grande anomalia da contagem em placa”. Atualmente, apesar de a maioria das informações sobre bactérias ser proveniente de linhagens cultivadas, mais da metade dos filos bacterianos não possui representantes cultivados, os quais podem apresentar uma biologia distinta da observada até então. As dificuldades de cultivo, aliadas ao alto custo e ao tempo necessário para o crescimento desses microrganismos, faz com que a pesquisa envolvendo bactérias de crescimento lento seja menos atrativa. No entanto, alguns microrganismos de baixa abundância conseguem sintetizar enzimas mais estáveis e eficientes em diferentes faixas de pH e temperatura. Entre as enzimas de interesse biotecnológico a xilanase se destaca na degradação da biomassa vegetal, pois esse material apresenta grande potencial para a produção de bioenergia, biomoléculas e biomateriais, colaborando para a redução da dependência mundial de combustíveis fósseis. Para explorar o potencial biotecnológico das bactérias de crescimento lento e sobrepujar as dificuldades de trabalhar com estes isolados, o objetivo deste trabalho é realizar a expressão heteróloga da xilanase codificada pela Acidobacteria bacterium AB60. Para tanto, foi realizada uma prospecção gênica através do genoma anotado desta bactéria e o gene codificante da xilanase foi clonado no vetor pET-21a(+), que foi sintetizado artificialmente e utilizado para fazer a transformação genética da Escherichia coli BL21. A bactéria transformada foi induzida a produzir a xilanase recombinante por meio da ação do IPTG sobre o vetor de expressão, a síntese foi identificada via gel de poliacrilamida e a enzima recombinante foi purificada por meio da resina que interagiu com a His-Tag presente no vetor. A atividade enzimática foi avaliada a partir da degradação da xilana. A xilanase recombinante apresentou atividade catalítica, formando halos de degradação na xilanase nos locais inoculados. Assim, espera-se que o potencial biotecnológico de isolados cujo cultivo é desafiador seja mais explorado com a abordagem da expressão heteróloga a fim de se obter enzimas recombinantes que possam ser mais estáveis para as aplicações industriais. |
| Palavras-chave |
Cultivo, Enzimas, Clonagem. |
| Forma de apresentação..... |
Painel |