Das Montanhas de Minas ao Oceano: Os Caminhos da Ciência para um Futuro Sustentável
20 a 25 de outubro de 2025
Trabalho 21866
| ISSN | 2237-9045 |
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| Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
| Nível | Graduação |
| Modalidade | Pesquisa |
| Área de conhecimento | Ciências Biológicas e da Saúde |
| Área temática | Dimensões Sociais: ODS3 |
| Setor | Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular |
| Bolsa | PIBIC/CNPq |
| Conclusão de bolsa | Sim |
| Apoio financeiro | CNPq |
| Primeiro autor | Júlia Gabrielle Oliveira de Souza |
| Orientador | ANDREA DE OLIVEIRA BARROS RIBON |
| Outros membros | Ananda Pereira Aguilar, Luiza de Oliveira Possa, Tarciza Fernandes Nascimento |
| Título | EXPRESSÃO HETERÓLOGA E PURIFICAÇÃO DE LIPOPROTEÍNAS DE Staphylococcus aureus |
| Resumo | Staphylococcus aureus é um dos principais agentes etiológicos da mastite bovina, uma inflamação da glândula mamária que pode se apresentar de forma clínica, com sintomas visíveis, ou subclínica, em que não há sinais externos aparentes. Entre os diversos fatores de virulência associados à patogenicidade do S. aureus, destacam-se as lipoproteínas (Lpl), que são proteínas de superfície envolvidas na colonização do tecido mamário e na evasão do sistema imunológico do hospedeiro. Essas proteínas parecem desempenhar papel essencial na capacidade das cepas subclínicas de se estabelecerem de maneira mais eficiente no epitélio mamário. Estudos anteriores demonstraram uma baixa homologia entre as lipoproteínas da cepa subclínica S. aureus 302 e da cepa clínica RF122, o que sugere que essas diferenças estruturais podem afetar a interação entre as cepas e as células do epitélio mamário bovino. Com base nisso, este trabalho teve como principal objetivo expressar as lipoproteínas das duas cepas visando análises futuras sobre a interação patógeno-hospedeiro. Para isso, os genes lpl foram amplificados dos genomas bacterianos, clonados inicialmente no vetor pGEM-T Easy e confirmados por PCR. Em seguida, o DNA plasmidial foi extraído, digerido com as enzimas de restrição Nhe I e Xho I e subclonado no vetor de expressão pET28a. As construções foram transformadas em E.coli C41 e BL21 pLys, e a presença dos insertos foi confirmada por PCR. A expressão da Lpl da cepa 302 foi obtida com sucesso após 2 horas de indução com 0,4 mM de IPTG, enquanto a expressão da Lpl da cepa RF122 não foi detectada, possivelmente devido à presença de múltiplas regiões transmembranares. Atualmente, a expressão da Lpl 302 está sendo realizada em grande escala, visando à purificação da proteína recombinante. A obtenção dessas proteínas permitirá estudos estruturais e funcionais comparativos, contribuindo para o entendimento dos mecanismos moleculares envolvidos na patogenicidade de cepas clínicas e subclínicas de S. aureus na mastite bovina. |
| Palavras-chave | Staphylococcus aureus, Lipoproteínas (Lpl), Expressão heteróloga. |
| Forma de apresentação..... | Painel |
| Link para apresentação | Painel |
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