Das Montanhas de Minas ao Oceano: Os Caminhos da Ciência para um Futuro Sustentável
20 a 25 de outubro de 2025
Trabalho 21053
| ISSN | 2237-9045 |
|---|---|
| Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
| Nível | Graduação |
| Modalidade | Pesquisa |
| Área de conhecimento | Ciências Biológicas e da Saúde |
| Área temática | Dimensões Econômicas: ODS8 |
| Setor | Departamento de Tecnologia de Alimentos |
| Bolsa | PIBITI/CNPq |
| Conclusão de bolsa | Sim |
| Apoio financeiro | CNPq |
| Primeiro autor | Renan Machado Dias |
| Orientador | MONIQUE RENON ELLER |
| Outros membros | Larissa Cassemiro Pacheco Monteiro, Lorena Arlinda Pena, TIAGO ANTONIO DE OLIVEIRA MENDES |
| Título | Desenvolvimento de imunoensaios para detecção de Pseudomonas spp. |
| Resumo | Pseudomonas é um gênero de bactérias gram-negativas, aeróbias e móveis, amplamente distribuídas no ambiente. Dentre as mais de 600 espécies, destacam-se P. aeruginosa, associada a infecções hospitalares e à resistência antimicrobiana, e P. fluorescens, responsável pela deterioração de alimentos refrigerados por meio da produção de proteases e lipases termorresistentes. Os métodos convencionais de detecção dessas bactérias são geralmente caros, lentos e demandam mão de obra especializada. Este trabalho teve como objetivo desenvolver um método rápido, econômico e de fácil aplicação para detecção de Pseudomonas spp. utilizando a proteína da cauda do bacteriófago UFV-P2 como sensora para um ensaio Dot-ELISA. Para isso, alíquotas de diferentes suspensões bacterianas (Escherichia coli, Staphylococcus aureus e três cepas de P. fluorescens e P. aeruginosa foram depositadas em membranas de nitrocelulose. Após secagem, as membranas foram bloqueadas com solução de PVA 5% m/v por uma hora e lavadas com PBS-T (3×5 min). O bioconjugado foi preparado por funcionalização de nanopartículas de ouro (AuNP) com estreptavidina-HRP, seguido da adição da proteína sensora recombinante. A solução foi estabilizada com soroalbumina bovina (BSA) a 1% m/v, incubada e centrifugada para remoção da proteína não conjugada, sendo o pellet final ressuspendido em tampão de ligação contendo sacarose, BSA, Tween 20 e PEG. O teste revelou coloração visível e localizada apenas na amostra 3 (P. fluorescens 07A), indicando interação positiva entre o bioconjugado e essa cepa. Nas demais amostras, incluindo outras cepas de Pseudomonas sp. e os controles negativos, não houve reação significativa ou foi observada apenas coloração de fundo difusa, sem padrão específico. Esses resultados sugerem uma possível especificidade da proteína sensora para a cepa 07A, com limitações quanto à abrangência geral do sistema e à eficiência do bloqueio, indicando possível adesão inespecífica do bioconjugado. A ausência de resposta nas outras cepas pode estar relacionada ainda à baixa afinidade de ligação, diferenças na expressão de epítopos ou necessidade de ajustes na concentração da proteína ou na formulação do tampão de ligação. Conclui-se que o Dot-ELISA apresenta potencial como método qualitativo para triagem de Pseudomonas spp., mas exige melhorias nas etapas de bloqueio, revelação e padronização do bioconjugado para alcançar sensibilidade, especificidade e reprodutibilidade adequadas para aplicação prática em ambientes industriais e laboratoriais. |
| Palavras-chave | biocontrole, sistema de detecção, P. fluorescens |
| Forma de apresentação..... | Painel |
| Link para apresentação | Painel |
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