Resumo |
Mahanarva spectabilis, conhecida como cigarrinha-das-pastagens, é o principal inseto-praga que causa danos às forrageiras tropicais, afetando negativamente a produção de gado e a cadeia leiteira. As ninfas infestam as regiões das raízes, produzindo uma espu-ma como mecanismo de proteção ambiental e defesa contra predadores. Para avaliar se a planta hospedeira afeta a composição dessa espuma, gramíneas com diferentes níveis de resistência ou suscetibilidade ao ataque da cigarrinha foram submetidas à infestação.As espécies Pennisetum purpureum cv. Pioneiro e cv. Botucatu, Brachiaria decumbens cv. Basilisk e Brachiaria brizantha cv. Marandu foram cultivadas em vasos de 1 L com solo e substrato Plantmax. Ninfas e espumas foram coletadas e armazenadas a -80 °C. As amostras de espuma foram concentradas em speed vac. Uma alíquota das proteínas foi separada por SDS-PAGE; as bandas foram excisadas, quantificadas por densitometria e digeridas com tripsina para gerar peptídeos trípticos. Esses foram analisados por LC/MS em sistema Orbitrap. As sequências de RNA-seq foram obtidas por um sistema Illumina HiSeq 2500.Os perfis de SDS-PAGE revelaram onze bandas principais, cujas abundân-cias variaram entre os genótipos, sugerindo que a planta hospedeira modula a composi-ção da espuma. Além disso, plantas resistentes afetaram essas abundâncias, sugerindo um possível mecanismo de redução da sobrevivência das ninfas. A análise dos espectros no Peaks Studio, usando o banco UniProt, não identificou proteínas. Foi então gerado um banco de dados de RNA-seq para sequenciar genes expressos pelas ninfas e realizar a identificação proteica por LC/MS.Todas as proteínas identificadas apresentaram fun-ção desconhecida e nenhuma homologia com proteínas do banco UniProt. Curiosamen-te, foram observados diferentes IDs de contigs para o mesmo ponto proteico, sugerindo ocorrência de processamento pós-transcricional e pós-traducional. Alinhamentos Clustal das sequências apoiaram essa hipótese.Modelos estruturais gerados com AlphaFold3 para as proteínas mais abundantes revelaram predominância de domínios alfa-hélice, indicando conservação de função. As proteínas foram classificadas em quatro categorias funcionais amplas: (i) componentes da matriz estrutural; (ii) proteínas relacionadas ao sistema imune e à ligação de lipídios; (iii) proteínas de membrana externa ou de transpor-te; e (iv) proteínas hipotéticas ou secretadas de função desconhecida.A caracterização dessas proteínas pode auxiliar no desenvolvimento de estratégias de controle biotecno-lógico desse inseto-praga, promovendo práticas agrícolas mais sustentáveis, com menor uso de agrotóxicos. Isso contribui para o alcance do Objetivo de Desenvolvimento Sus-tentável 2 da ONU (Fome Zero e Agricultura Sustentável), ao favorecer o aumento da produtividade pecuária com menor impacto ambiental. |