Resumo |
Kefir é uma bebida fermentada feita de uma comunidade microbiana simbiótica. Estudos relatam que o kefir de leite possui propriedades anti-inflamatórias, antimicrobianas, antioxidantes, alterando a microbiota intestinal contribuindo, portanto, para a saúde intestinal. No entanto, sua composição e diversidade bacteriana ainda é pouco explorada. Os objetivos deste trabalho foram identificar a composição nutricional e caracterizar a microbiota do kefir de leite. Os grãos de kefir foram ativados, cultivados diariamente e inoculados na concentração de 10% (20g de grãos de kefir em 200 mL de leite de vaca integral UHT). Os frascos foram mantidos à temperatura ambiente, por 24 horas. Em seguida, os grãos foram recuperados por peneiramento, lavados com água destilada e inoculados no leite novamente. Posteriormente, o leite fermentado de kefir produzido, procedeu à maturação, sob refrigeração por mais 24 horas. As determinações da composição nutricional do kefir foram realizadas em triplicatas pelos métodos descritos pela Association of Official Analytical Chemist – AOAC e o DNA do kefir foi extraído com base no método CTAB (brometo de cetiltrimetilamônio). A qualidade e quantificação do DNA foi analisada por nanodrop e Polymerase Chain Reaction (PCR) com primers de rRNA 16s a qual foi realizada para verificar a presença de impurezas. Para a análise de bioinformática do perfil da microbiota foram realizados sequeciamento da região hipervariável V3-V4 do gene 16S rRNA, em que a qualidade das sequências foi avaliada através do pacote FastQC. As sequências de baixa qualidade foram trimadas e as sequências de alta qualidade foram analisadas no pacote DADA2 implementado na plataforma R e alinhados ao banco de dados Silva 16S rRNA, sendo os níveis de interesse taxonômico avaliados: filo, família e gênero. Os dados foram representados por distribuição relativa utilizando o GraphPad Prism software, versão 8.3.0. A bebida kefir apresentou redução nos carboidratos totais e valor energético, em relação ao leite integral UHT. Foram encontradas nas amostras 781 OTUs demonstrando boa qualidade do DNA extraído. Os filos bacterianos mais prevalentes nas amostras de kefir foram Proteobacteria (81,3%), Firmicutes (17,1%) e Bacteroidetes (1,6%). Burkholderiaceae foi a família mais abundante (54,0%) e o gênero Comamonas representou a maior parte da sua composição (54,0%). O kefir de leite demonstrou composição característica e segurança microbiológica de acordo com as legislações para alimentos fermentados. O DNA encontrado nas amostras de kefir são de bactérias características do produto e que podem causar doenças ou deterioração. Assim, diante desses resultados, futuros pesquisadores têm a possibilidade de criar estratégias de uso, comercialização e novos tratamentos de doenças intestinais com base na composição da microbiota individual. |