“Bicentenário da Independência: 200 anos de ciência, tecnologia e inovação no Brasil e 96 anos de contribuição da UFV”.

8 a 10 de novembro de 2022

Trabalho 17270

ISSN 2237-9045
Instituição Universidade Federal de Viçosa
Nível Graduação
Modalidade Pesquisa
Área de conhecimento Ciências Biológicas e da Saúde
Área temática Medicina veterinária
Setor Departamento de Veterinária
Bolsa FAPEMIG
Conclusão de bolsa Não
Apoio financeiro FAPEMIG
Primeiro autor Eugênio Scolforo Louzada
Orientador FABRICIO LUCIANI VALENTE
Outros membros Jéssica Lelis de Miranda, MARLENE ISABEL VARGAS VILORIA, Nathalia Mendes Figueiredo, Renata Magnoni Venturin
Título Expressão de CRYAB em sarcomas de tecidos moles caninos e sua relação com grau histológico
Resumo Os sarcomas de tecido mole (do inglês, soft tissue sarcoma ou STS) são neoplasias malignas que englobam diversos tipos de tumores de tecidos de origem mesenquimal. Aproximadamente 50% pacientes acometidos por este tipo de tumor têm sobrevida média próxima de 5 anos e mais de 25% desenvolvem metástase. Os cães são acometidos por STSs de forma muito semelhante aos humanos, o que os torna grandes candidatos a modelo experimental para este tipo de sarcoma, tornando necessário o desenvolvimento de técnicas diagnósticas eficazes. A imuno-histoquímica (IHQ) é uma técnica que pode ser empregada para identificar e avaliar marcadores prognósticos de malignidade em tecidos tumorais. A alfa-b cristalina (CRYAB) é uma proteína de choque térmico que, nos últimos anos, vem sendo relacionada ao desenvolvimento de metástases e angiogênese de tumores em humanos. O objetivo deste trabalho é relacionar a expressão da CRYAB com os graus histológicos que levam em conta a quantidade de figuras mitóticas das células, necrose e diferenciação tecidual do tumor. Entre 2017 e 2021 o Laboratório de Patologia do Departamento de Veterinária da UFV diagnosticou, por meio de avaliação e graduação histopatológica, 136 casos de STSs em cães, com idades entre 9 meses e 18 anos, com sua maior prevalência entre pacientes idosos (7 anos ou mais) com 84 casos. Todos os casos foram analisados, tendo sido selecionadas 10 amostras de cada grau histológico (I, II e III) e, como controle positivo, uma amostra de tecido renal de cão, que expressa a CRYAB naturalmente. A fim de validar a técnica, foi realizado experimento piloto utilizando o mesmo protocolo de IHQ empregado para tumores de mama pelo nosso grupo de pesquisa. A recuperação antigênica foi realizada em solução tampão citrato pH 6,0 aquecida a 95⁰C em dois ciclos de 5 minutos e resfriadas ao ar livre por 30 minutos, seguido por três imersões por 2 minutos em água destilada. Depois, foi utilizado o bloqueador de peroxidase por 10 minutos, os cortes foram lavados com água destilada e incubados com o bloqueador de proteína por mais 10 minutos em temperatura ambiente. Os anticorpos primários anti-CRYAB foram incubados por 1 hora a 37⁰C e lavados três vezes com PBS pH 7,4 durante 2 minutos cada. Os cortes foram incubados com o polímero por 20 minutos, lavados três vezes com PBS pH 7,4 por 2 minutos e incubados por 5 minutos com o cromógeno DAB. A contracoloração foi realizada com hematoxilina; as lâminas foram montadas e a avaliação foi feita de acordo com a intensidade da marcação e quantidade de células marcadas. Como resultado, observou-se que as lâminas tumorais dos grupos I e II foram discretamente coradas pela técnica, e as lâminas do grupo III e controle sem coloração visível, demonstrando uma falha na técnica e a necessidade de ajustes no protocolo antes que novas tentativas sejam realizadas.
Palavras-chave neoplasia, imuno-histoquímica, cães
Forma de apresentação..... Painel
Link para apresentação Painel
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