Resumo |
A produção de soja no Brasil sofre ataques de insetos pragas ao longo de seu desenvolvimento, ocasionando redução da qualidade dos grãos e perdas da produção. Dentre as pragas, a lagarta-da-soja (Anticarsia gemmatalis Hübner, 1818) tem um papel de destaque, sendo uma das principais pragas da cultura. Estudos sobre o efeito da ingestão de inibidores de proteases no desenvolvimento de herbívoros vêm sendo realizados a fim de compreender melhor sua capacidade inseticida. Com isso, o objetivo do presente trabalho foi avaliar o efeito de tripeptideos GORE1 e GORE2 nos parâmetros nutricionais e na afinidade de enzimas tripsinas-like ao seu substrato, em lagartas com desequilíbrio da microbiota intestinal. Para o estudo, foram utilizados 6 tratamentos: controle (sem adição de tetraciclina ou inibidores de proteases); tetraciclina; inibidor de proteases GORE1; inibidor de proteases GORE2; tetraciclina + GORE1; tetraciclina + GORE2, com 30 indivíduos por tratamento. Para os parâmetros nutricionais, foram realizadas pesagens da dieta ofertada e de sua sobra, fezes e os pesos iniciais e finais das lagartas. O intervalo de tempo avaliado foi de 24 h, e os parâmetros avaliados foram: eficiência de conversão do alimento ingerido (ECI); eficiência de conversão do alimento digerido (ECD) e digestibilidade aproximada (AD). O ensaio enzimático foi realizado com o extrato bruto oriundo da maceração de 5 intestinos de A. gemmatalis de 5º instar, homogeneizados em 1 mL de solução HCl a 10-3 M e centrifugados a 10.000 rpm a 4 ºC por 30 min. Para a avaliação da cinética enzimática, foram utilizados: extrato bruto, solução tampão Tris-HCl a 0.1 M, 20 mM CaCl2, pH 8,2, e substrato cromogênico L-BApNA nas concentrações 32, 16, 08, 04 e 02 mM. As leituras da atividade enzimática foram realizadas em placa, no espectrofotômetro, a 410 nm durante 120 s usando o coeficiente de extinção molar específico 8800 M-1cm-1. A ECI e a ECD tiveram uma redução significativa quando os tripeptideos (com ou sem o antibiótico) foram adicionados à dieta artificial em relação ao tratamento controle e ao tratamento com tetraciclina. Em relação à AD, não houve diferença significativa entre os tratamentos. A avaliação da afinidade da protease tripsina-like ao substrato L-BApNA apontou uma redução na afinidade da protease pelo seu substrato, tendo o controle um KM (constante de Michaelis-Menten) de 0,17 mM, o tratamento com antibiótico 0,28 mM, com os tripeptideos GORE1 0,46 mM, GORE2 0,38 mM e com a tetraciclina + GORE1 0,50 mM e tetraciclina + GORE2 0,52 mM. Com os resultados obtidos, podemos observar que os tripeptideos foram capazes de afetar os parâmetros nutricionais diminuindo a eficiência na conversão do alimento e na efetividade das proteases em se ligarem ao seu substrato. Análises complementares são necessárias para mensurar os efeitos biológicos causados pela ingestão dos tripeptideos nas lagartas e proporcionar direcionamentos para sua utilização no manejo integrado de pragas. |