Resumo |
Segundo a Organização Mundial da Saúde o câncer é um importante problema de saúde pública mundial e uma das quatro principais causas de morte prematura. A ineficácia de tratamentos usando quimioterápicos e as constantes aquisições de resistência pelas células cancerosas embasam a necessidade da descoberta de novos medicamentos. Produtos naturais já demonstraram capacidade antimutagênica e antiproliferativa. Nesta perspectiva, o estudo de produtos naturais é potencial alternativa, pois, geralmente, são de baixa toxicidade e baixo custo. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do extrato obtido a partir do fungo endofítico de folhas de Senna spectabilis, Phaeoacremonium sp., na viabilidade celular das linhagens normal Melan-a (Melanoblastos normais de camundongos) e cancerígena 4T1 (Carcinoma mamário de camundongos), através de ensaios de MTT (3- (4,5-dimetiltiazol-2-il) -2,5-brometo de difeniltetrazólio), calcular a concentração inibitória de 50% das células (IC50) e o índice de seletividade (IS). Micélios do fungo foram multiplicados em meio batata dextrose ágar (BDA) e em seguida transferidos para o meio batata glicose (BG). Em intervalos de 7 dias foram retiradas alíquotas do caldo e após 28 dias, todo o restante do caldo foi tratado com o solvente acetato de etila. As linhagens foram cultivadas em meio de cultivo RPMI1640 (10% SFB e 1% antibióticos) em estufa a 37°C, 5% de CO2 e 95% de umidade atmosférica até a confluência. Soluções de concentrações crescente: 12,5; 25; 50; 100; 200; 400; 500 e 600 µg/mL do extrato diluídos em dimetilsulfóxido (DMSO) 0,5% foram preparadas e incorporadas ao meio de cultivo celular. Decorrido 48h de tratamento, foi realizada a substituição do meio contendo extrato por solução de MTT e posteriormente os cristais de formazan foram dissolvidos com DMSO. A viabilidade celular foi calculada pela relação entre as médias das absorbâncias obtidas a 570 nm dos tratamentos e controle. As absorvâncias obtidas foram utilizadas para cálculo da viabilidade celular percentual que permitiu a estimativa do valor de IC50 e o IS. Tanto as alíquotas quanto o extrato foram analisados por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE), coluna LC18 e fase móvel acetonitrila 54%. Do extrato foram recolhidas quatro frações, uma delas identificou isoaigialona A. O rendimento médio do extrato foi de 14mg/100mL de meio e as concentrações de isoaigialona A, no caldo foram: 10 µg/mL, 13 µg/mL, 68 µg/mL e 78 µg/mL em 7, 14, 21 e 28 dias, respectivamente. O extrato reduziu a viabilidade celular em ambas as linhagens. Para 4T1 o valor de IC50 foi de 107,1 µg/mL (R2: 0,90), enquanto para Melan-a o valor foi superior, IC50: 249,1 µg/mL (R2: 0,80). Esse comportamento refletiu o IS do extrato bruto de 2,32. Considerando o exposto, o extrato de acetato de etila de Phaeoacremonium sp. pode representar um potencial fármaco para quimioterapia devido sua seletividade para o câncer de mama murino in vitro. |