Resumo |
A família Orchidaceae é uma das maiores famílias entre as angiospermas com cerca de 850 gêneros e 20.000 espécies distribuídas por todo o mundo,e com maior diversidade encontrada no Brasil. A espécie Cattleya locatellii ocorre a leste de Belo horizonte, próximo a cidade de Araponga, a 1500m de elevação em bordas abertas inclinadas com alguma proteção, crescendo entre velozias, bromélias e gramíneas, e apresenta florescimento entre julho e agosto. A espécie foi descrita no ano de 2016 e encontra-se em risco de extinção.As orquídeas se associam a uma grande diversidade de fungos micorrízicos e endofíticos radiculares que podem ter efeito benéfico no desenvolvimento da planta. Entretanto, não há informações sobre fungos associados à espécie C. locatellii. Diante disso, objetivou-se com esse trabalho, o estudo da diversidade de fungos endofíticos associados ao sistema radicular de C. locatellii, através de análises morfológicas e moleculares. Raízes saudáveis de C. locatellii foram coletadas no município de Araponga, no estado de Minas Gerais e trazidas ao laboratório de Micologia e Etiologia de Doenças Fúngicas de Plantas (DFP/UFV), onde foi realizado o isolamento de fungos endofíticos pelo do método de extinção. Os isolados foram cultivados em meio CMA (Corn meal agar) e BDA (Batata dextrose ágar). O DNA genômico foi extraído utilizando o Kit Wizard Genomic DNA Purification (Promega Corporation, WI) e a região gênica de “Internal Transcribed Spacer” (ITS) foi amplificada usando os primers ITS1 e ITS5. As sequências obtidas foram comparadas com sequências disponíveis no banco de dados GenBank através da ferramenta MegaBlast. Para as análises morfológicas, lâminas foram confeccionadas em lactoglicerol a partir das estruturas fúngicas produzidas em meio de cultura. As imagens foram obtidas através de um microscópio de luz Olympus BX-53 equipado com uma câmera digital (OLYMPUS Q-Color 5™) e medições foram realizadas com auxílio do software (cellSens 1,9 DIGITAL - OLYMPUS). Com base nas análises morfológicas e na sequência de DNA, um isolado foi identificado como pertencente ao gênero Toxicocladosporium. Este apresentou Clamidósporos castanho escuro a castanho claro, subglobosos, medindo 8,6 × 7,8 μm; hifas vegetativas septadas,ramificadas, hialinas a castanho, com 2,8 μm de largura; ramoconidio primários castanhos, subcilíndricos, medindo 13,3 × 2,4 μm; ramoconidio secundários castanhos, subcilíndricos, medindo 8,6 × 2,4 μm e conídios castanhos, subcilindricos a fusiformes, medindo 9,0 × 3,0 μm. Esse é o primeiro relato de Toxicocladosporium como endofítico radicular em plantas da família Orchidaceae, especificamente em C. locatellii. O presente trabalho contribui para o conhecimento sobre a diversidade de fungos endofíticos radiculares em C. locatellii. |