Resumo |
Os insetos-pragas, em especial da ordem lepidóptera, são uma das principais causas de danos na agricultura, podendo ser responsáveis por perdas consideráveis na produção agrícola. Com o intuito de reduzir as populações desses insetos sem grandes danos ao meio ambiente, a utilização de controle biológico se mostrou uma ferramenta promissora para o manejo integrado de pragas (MIP). As espécies de bactérias do gênero Bacillus, com destaque para as espécies Bacillus thuringienses (Bt), são os principais agentes do controle biológico devido a capacidade de sintetizar toxinas ou substâncias inseticidas que provocam a morte do inseto. As características toxicológicas estão relacionadas principalmente à produção de proteínas cristalinas que são codificadas por genes cry, porém, o Bt também pode secretar proteínas, com alta atividade inseticida, denominadas VIPs. Com o objetivo de caracterizar molecularmente bactérias com potencial para serem utilizados no MIP, 8 isolados de Bacillus spp. foram selecionadas e uma cepa padrão (isolado 1450). Os experimentos foram conduzidos no Laboratório de Bioquímica e Genética Molecular da Universidade Federal de Viçosa – Campus Rio Paranaíba, Minas Gerais. Inicialmente, os isolados foram cultivados em placa de Petri contendo o meio ágar nutriente (AN), onde foram semeados por estriamento e mantidos em estufa do tipo BOD a 30°C. Posteriormente, realizou-se a extração do DNA genômico utilizando fenol-clorofórmio. A integridade das amostras de DNA foi analisada em gel de agarose 1 % e quantificado através do equipamento Nanodrop a 260 nm. Para a caracterização molecular foram analisados seis primers cry-específicos e um primer específico para a proteína VIP3A. Dentre os isolados, cinco apresentaram genes cry no seu genoma: Cry1 (GB08, GB10 e 1450), Cry1Ac (GB01, GB05, GB10 e 1450), Cry2 (GB10), Cry2Aa (GB10) e Cry9 (1450). O amplicon mais frequente foi o Cry1Ac presente em 44,4% dos isolados. O gene VIP3A estava presente em 22,2% dos isolados (GB10 e 1450). Os isolados GB16, GB24, GB29 e 307 não apresentaram amplicons para nenhum gene analisado. Os resultados indicam que, dos 9 isolados analisados, 5 apresentaram genes que codificam proteínas inseticidas e que podem ser promissoras no controle biológico. O potencial dos isolados em garantir o controle das populações de insetos-pragas deve ser confirmado posteriormente em ensaios biológicos em lepidópteras. |