Resumo |
Os insetos são um grupo de grande sucesso evolutivo, possuindo desenvolvimento por meio de vários tipos de metamorfose como um dos principais fatores. Dentre os holometábolos, insetos que possuem vários estágios de desenvolvimento (ovo, larva, pupa e adulto), as abelhas Apis mellifera (Hymenoptera, Apidae) destacam-se como um importante modelo biológico. Dois hormônios centrais atuam como coordenadores das alterações que ocorrem durante a metamorfose e determinação de castas, no caso das abelhas: os ecdisteróides e o hormônio juvenil. Dentre os elementos de resposta a esses hormônios, encontram-se fatores de transcrição, como o Broad- Complex (BR-C). BR-C é um gene da via de sinalização dos ecdisteróides, que tem como função canônica a determinação do estágio de pupa nos holometábolos. Já foram encontradas várias isoformas de BR-C em diversas espécies de insetos, com diferentes níveis de expressão em tecidos e/ou estágios de desenvolvimento variados. Isso sinaliza que esse gene, provavelmente possui uma função não limitada à determinação do estágio pupal. Em abelhas, não se conhece os padrões de expressão de BR-C ao longo do desenvolvimento pós-embrionário. Sendo assim, o objetivo do deste trabalho foi analisar a expressão diferencial das isoformas de BR-C ao longo do desenvolvimento larval de operárias de Apis mellifera. Larvas de operárias em diferentes fases de desenvolvimento (L4 até Pupa de olho branco) foram coletadas diretamente das colônias mantidas no Apiário Central da UFV. O RNA total foi extraído e utilizado para síntese do cDNA. Inicialmente, foram realizadas análises qualitativas de expressão das diferentes isoformas encontradas nessa abelha (Z1 a Z5), por meio de PCR convencional e eletroforese em gel de agarose. Com esses resultados, as isoformas Z3 e Z4 foram escolhidas para análise quantitativa por meio de PCR em tempo real, nas fases: L4, L5F2, L5S2, L5PP1 e POB. Ambas as isoformas apresentaram um maior nível de expressão no estágio L5F2. Para Z4, esses níveis são reduzidos gradativamente nos estágios posteriores analisados. A expressão da isoforma Z3 é reduzida em S2 e volta a aumentar na pré-pupa (L5PP2), com nova redução no estágio seguinte. Esses resultados sugerem que o papel de BR-C vai além da determinação do estágio de pupa em abelhas, podendo atuar como um marcapasso do desenvolvimento pós-embrionário. Análises comparativas futuras determinarão o papel desse fator na determinação de castas deste inseto. |